局部應用重組水蛭素對兔耳靜脈淤血皮瓣成活的影響.pdf

1、目的：數百年來，皮瓣移植是整形外科最基本、最常用的創(chuàng)面修復方法。皮瓣的壞死或部分壞死，仍是急需解決的問題。伴隨整形外科事業(yè)的發(fā)展，皮瓣壞死的防治及機理研究，一直是臨床醫(yī)師研究的熱點。近年來，國內外學者為促進皮瓣成活進行了大量的實驗研究，但多集中于血管擴張劑、血管生長因子和控制炎癥阻止中性粒細胞粘附的藥物，即促進皮瓣的血運重建，從而提高皮瓣的成活率。經統計，臨床皮瓣失敗的原因，大多數是靜脈回流問題，淤血的組織微循環(huán)內可能形成血栓，影響組織

2、的營養(yǎng)，最后導致組織的壞死，即使組織成活，皮瓣可能變得僵硬，還有色素沉著。因此抗凝治療防治皮瓣靜脈淤血進而改善皮瓣的成活成為大家研究的熱點。一直以來，因缺乏一個理想的靜脈淤血皮瓣模型，故對皮瓣的靜脈淤血的實驗研究較少。在抗凝治療中，具有較強抗凝、抗血栓作用的低分子肝素在臨床上廣為應用，明顯提高了皮瓣的成活率，但在肝素治療過程中，有引起組織出血、肝素誘導的血小板減少癥等全身或局部并發(fā)癥的發(fā)生，使其應用受到一定的限制。水蛭素是迄今為止最強的

3、直接凝血酶抑制劑，其作用機制主要包括：抑制凝血酶的蛋白酶解作用；抑制凝血酶誘導的血小板釋放和聚集；降解纖維蛋白的特定肽鏈，阻止血栓形成并融解已經形成的血栓等。水蛭素與肝素等傳統的抗凝藥物相比，其治療劑量小、療效好、不良反應少而輕，不會引起過敏反應。本實驗通過阻斷兔耳主要靜脈回流通道，而保留其動脈血運建立淤血皮瓣模型，局部分別應用重組水蛭素和低分子肝素，觀察并比較兩者對靜脈淤血皮瓣的保護作用及其機制。 方法：健康普通大耳白兔18只

4、，雌雄不拘，體重(2200±200g)，隨機分為3組：1個對照組(A組：注射生理鹽水組)和2個治療組(B組：低分子肝素治療組；C組：重組水蛭素治療組)，每組6只，實驗前晚停止喂飼，按0.2 mg/kg體重、2％戊巴比妥鈉右耳緣靜脈注射麻醉，麻醉后側臥位，固定四肢，消毒鋪無菌巾。在左耳背部設計寬為3cm、長為6cm的、以含耳中央血管、神經為蒂(蒂寬1cm)的軸型皮瓣。在光學放大鏡下，分離耳中央靜脈和神經，并于蒂部切斷并結扎，一并結扎其他旁

5、支靜脈，創(chuàng)面用5-0絲線結扎止血。制成以耳中央動脈為唯一血供、1cm寬的蒂部為唯一靜脈回流途徑的靜脈淤血皮瓣模型。治療組分別在術后立即給予皮瓣下三點、均勻注射水蛭素(1U/1ml/皮瓣)或低分子肝素(625IU/1ml/皮瓣)，對照組同法給予等量(1ml)生理鹽水，皮瓣用5-0絲線原位縫合，無菌敷料保護。術后觀察皮瓣表面毛發(fā)脫落情況，血腫形成情況，皮瓣存活率，組織學觀察皮瓣毛細血管內血栓形成情況，中性粒細胞附壁及紅細胞聚集情況，免疫組化

6、檢測皮瓣內VEGF蛋白的含量。 結果：①肉眼觀察：皮瓣形成后所有皮瓣均腫脹明顯，遠端淤血形成，顏色暗紅。術后第一天，對照組顏色明顯深于治療組。血腫形成情況：重組水蛭素治療組1例(1/6)，低分子肝素治療組2例(2/6)，生理鹽水對照組4例(4/6)皮瓣下出現明顯的血腫。②各組皮瓣成活率：低分子肝素及重組水蛭素治療組成活面積百分比分別為(92.33±1.67)％與(94.83±1.91)％，均比生理鹽水對照組(77.93±1.18

7、)％高，有顯著性差異(p＜0.01)，重組水蛭素與低分子肝素治療組皮瓣成活率相當，差異無統計學意義(p＜0.05)。③組織形態(tài)學觀察及皮瓣內VEGF測定：重組水蛭素治療組與低分子肝素治療組皮下毛細血管內血栓形成及紅細胞聚集均較對照組為輕，重組水蛭素治療組皮瓣中VEGF含量較其他兩組明顯增多。 結論：本實驗通過局部注射低分子肝素及重組水蛭素治療兔耳靜脈淤血皮瓣，明顯減輕了皮瓣內毛細血管和微靜脈內血栓形成、紅細胞聚集、中性粒細胞附壁