血管內(nèi)皮生長因子在肝缺血再灌注損傷中的作用及其干預(yù)研究.pdf

1、目的： 研究血管內(nèi)皮生長因子在肝臟缺血再灌注損傷中的作用以及抗血管內(nèi)皮生長因子單克隆抗體(Anti-VEGF mAb)預(yù)處理對肝臟缺血再灌注損傷(IRI)的預(yù)防和保護(hù)作用，為臨床上移植器官缺血再灌注損傷(IRI)及由此引起的急性肝功能衰竭等提供新的預(yù)防和治療方法。 方法 (1)實驗對象為健康雄性SD大鼠30只，體重(300±20)g，隨機分為A組(手術(shù)對照組)，B組(缺血再灌注組)，C組(抗VEGF單克隆抗體干預(yù)

2、組)每組10只動物。B、C組建立70％肝缺血再灌注損傷模型，C組于缺血前15分鐘經(jīng)腹腔注射抗VEGF單克隆抗體(100ug/300g)；B組于缺血前15分鐘經(jīng)腹腔注射等量生理鹽水；A組僅作麻醉、開腹、不阻斷血流。 (2)采用全自動生化分析儀，測定缺血再灌注6小時后血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)的水平，了解大鼠肝功能的變化情況。 (3)采用Western免疫印跡(West

3、ern Blot)法檢測肝臟VEGF表達(dá)情況。 (4)采用HE染色觀察缺血再灌注6小時后大鼠肝臟組織病理變化情況。 (5)采用TUNEL法了解缺血再灌注6小時后大鼠肝臟組織細(xì)胞凋亡情況。 (6)采用比色法測定缺血再灌注6小時后大鼠肝臟組織內(nèi)髓過氧化物酶(MPO)的變化情況。 結(jié)果 (1)B組血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)水平明顯高于A組(p＜0.

4、01)，而C組應(yīng)用抗VEGF單克隆抗體后血清ALT、AST、LDt{水平顯著低于B組(p＜0.01)。 (2)缺血再灌注6小時后，B組肝組織中的VEGF表達(dá)水平較A組明顯增加，而C組肝組織中的VEGF表達(dá)顯著低于B組。 (3)缺血再灌注6小時后，B組肝組織形態(tài)學(xué)有明顯改變，而A、C組無明顯改變。 (4)缺血再灌注6小時后，B組肝細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯高于A組(p＜0.01)，而C組肝細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著低于B組。(p＜0.

5、01)(5)缺血再灌注6小時后，B組肝組織中的髓過氧化物酶(MPO)活性明顯高于A組(p＜0.01)，而C組肝組織中的髓過氧化物酶(MPO)活性升高不明顯，顯著低于B組(p＜0.01)。 結(jié)論 VEGF表達(dá)的上調(diào)參與大鼠肝臟缺血再灌注過程中肝臟的損傷以及抗VEGF單克隆抗體能有效減輕大鼠肝臟缺血再灌注損傷，緩解肝功能下降，對肝臟缺血再灌注損傷(IRI)的預(yù)防和保護(hù)作用。該研究為臨床上移植器官缺血再灌注損傷(IRI)及由此