藍(lán)光誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞凋亡及Gelsolin保護作用的實驗研究.pdf

1、四川大學(xué)博士學(xué)位論文藍(lán)光誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞凋亡及Gelsolin保護作用的實驗研究姓名：蔡善君申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：嚴(yán)密20040430Gelsolin基因重組真核表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人RPE細(xì)胞。ta果:傳代后細(xì)胞由多角形向橢圓形、不規(guī)則形或梭形成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)變，胞漿內(nèi)色素顆粒減少甚至消失。TUNEL染色陽性細(xì)胞的體積縮小變圓，胞核濃縮，邊聚成新月形或帽狀，細(xì)胞核碎裂成數(shù)個，細(xì)胞膜出胞。透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)線粒體腫脹，

2、線粒體內(nèi)膜靖消失粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張:溶酶體增加，內(nèi)含代謝產(chǎn)物。.AnnexinVFITCPI雙染流式細(xì)胞檢測:低于一定闡值(500士100Lux)的光照對RPE細(xì)胞損傷較輕，細(xì)胞凋亡及壞死隨光照強度的增強而增加:在20001500Lux光照強度，隨著光照時間延長，RPE細(xì)胞凋亡數(shù)量沒有增加，而細(xì)胞壞死逐漸增加20001500Lux光照6小時，光照后612小時損傷以細(xì)胞凋亡為主，細(xì)胞壞死數(shù)量增加不明顯，但隨著時間延長，凋亡繼發(fā)壞死細(xì)胞和壞死細(xì)

3、胞明顯增加。i線粒體膜電位檢測:不同強度的藍(lán)光照射人RPE細(xì)胞，熒光強度均明顯下降，并隨光照強度的增加呈逐漸下降趨勢在20001500Lux光照強度，光照低于一定時間(3小時)，RPE細(xì)胞熒光強度無明顯變化，當(dāng)光照達(dá)到一定時間(6小時)時，熒光強度明顯下降2000土500Lu、光照6小時，光照后6小時，熒光強度開始明顯下降一直持續(xù)到光照后48小時。6.20001500Lux光照強度光照6小時和12小時，兩組光照后24及36小時，CytC