安顫靈對(duì)帕金森病大鼠模型泛素—蛋白酶體系統(tǒng)的影響.pdf

1、研究背景：帕金森病(Parkinson disease，PD)是一種常見(jiàn)于中老年人的第二大神經(jīng)退行性疾病，為老年人2大慢性殺手之一。隨著老齡化社會(huì)的來(lái)臨，PD患病率正在世界范圍內(nèi)逐年增高，據(jù)世界帕金森病協(xié)會(huì)資料顯示，全球現(xiàn)有超過(guò)400萬(wàn)帕金森病患者。我國(guó)目前約有帕金森病患者172萬(wàn)，居全球第一，而且每年還要新增約10萬(wàn)患者。因此帕金森病已經(jīng)成為我國(guó)乃至世界各國(guó)面臨的重大醫(yī)學(xué)和社會(huì)問(wèn)題。 研究表明：中腦黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元變性缺失伴

2、胞漿內(nèi)Lewy小體的形成是帕金森病的主要病理改變。而越來(lái)越多的證據(jù)顯示Lewy小體的形成與泛素蛋白酶體系統(tǒng)(ubiquitin proteasome system，UPS)功能缺損密切相關(guān)。目前，在治療上，人們普遍采用以左旋多巴為主的替代療法，雖然在緩解PD患者癥狀上有一定療效，但同時(shí)也會(huì)出現(xiàn)一些嚴(yán)重的毒副作用，且不能有效阻止病情的發(fā)展。近年來(lái)的研究證實(shí)：中藥治療PD療效確切，在延緩疾病的進(jìn)程，減輕西藥治療后的不良反應(yīng)，控制PD的一些非

3、運(yùn)動(dòng)障礙癥狀等方面發(fā)揮了重要作用。但目前對(duì)中藥治療PD的機(jī)理探討上，國(guó)內(nèi)還多局限于從氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡、興奮性氨基酸毒性、免疫反應(yīng)等方面入手，未見(jiàn)對(duì)本病關(guān)鍵性病理環(huán)節(jié)UPS的研究。 本課題所采用的中藥復(fù)方安顫靈為導(dǎo)師吳正治教授在承擔(dān)國(guó)家十五科技攻關(guān)項(xiàng)目“帕金森病中西醫(yī)結(jié)合綜合治療優(yōu)化方案研究”工作期間，以古今文獻(xiàn)相關(guān)方藥的系統(tǒng)整體為基礎(chǔ)，結(jié)合多年科研和臨床經(jīng)驗(yàn)，并根據(jù)其提出的本病新的中醫(yī)病機(jī)假說(shuō)——“脾濕困阻、氣機(jī)不暢、肌肉失主

4、”，以理脾化濕為主，輔以行氣活血、柔肝止痙立法組方，經(jīng)反復(fù)篩選優(yōu)化而成的純天然中藥復(fù)方。經(jīng)過(guò)多年臨床應(yīng)用，對(duì)早中期帕金森病療效顯著，對(duì)晚期和多巴胺制劑失敏的帕金森病患者也有一定療效。 研究目的：本課題采用lactacystin損傷制作的PD體內(nèi)模型，利用免疫組化，Tunel觀察安顫靈在抗凋亡及改善UPS功能等方面的作用機(jī)制，旨在為中藥安顫靈治療PD提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為PD治療提供新的思路。 研究方法：本研究采用lactacy

5、stin立體定向注射入大鼠左側(cè)黑質(zhì)致密部和黑質(zhì)紋狀體通路，建立PD大鼠模型。經(jīng)行為測(cè)試成功的PD模型大鼠27只，隨機(jī)選取分為模型組、中藥組，每組10只，同時(shí)另取設(shè)對(duì)照組10只。對(duì)照組和模型組生理鹽水灌胃，中藥治療組同時(shí)間等體積安顫靈灌胃，共45d。給藥后第1、3、5周及給藥結(jié)束后分別行APO誘導(dǎo)，觀察其旋轉(zhuǎn)行為及其他異常行為并進(jìn)行記錄，分析安顫靈對(duì)PD大鼠模型的治療作用。給藥結(jié)束后每組隨機(jī)取2只大鼠行Tunel及免疫組織化學(xué)檢測(cè)，觀察各