大鼠液壓沖擊顱腦損傷模型的立體定向控制研究.pdf

1、目的:理想的顱腦損傷動物模型是研究顱腦損傷機制及其診療方法的重要基礎(chǔ)平臺。目前國內(nèi)外已經(jīng)開發(fā)了一系列顱腦損傷模型，尤其是大鼠等小動物的顱腦損傷模型，由于大鼠具有基因序列與人類較為接近、飼養(yǎng)容易、取材方便等優(yōu)點，現(xiàn)已成為最為常用的小動物的顱腦損傷模型。但目前的大鼠等小動物的顱腦損傷模型往往存在著致傷前清醒動物固定困難、致傷部位方向(尤其是對沖傷部位)難以精確控制、致傷力度不穩(wěn)定等缺點，導(dǎo)致小動物的顱腦損傷模型較大，直接影響了小動物顱腦損傷

2、實驗的質(zhì)量。為了克服上述缺點，穩(wěn)定小動物顱腦損傷實驗平臺，提高研究質(zhì)量，本研究使用標(biāo)準(zhǔn)化的手術(shù)方法及國際通用的液壓打擊儀，通過開發(fā)應(yīng)用小動物立體定向控制儀、改進液壓連接系統(tǒng)并優(yōu)化實驗流程，建立一個精度高、穩(wěn)定性強、重復(fù)性好、操作簡便的小動物液壓顱腦損傷模型。為進一步深入開展創(chuàng)傷性顱腦損傷的相關(guān)動物實驗研究奠定堅實的基礎(chǔ)。 方法:1、開發(fā)小動物立體定向控制儀：設(shè)計研制出能適應(yīng)各種方向、多種角度、可旋轉(zhuǎn)調(diào)節(jié)的立體定向固定裝置，該裝置

3、能夠在動物清醒狀態(tài)下對其進行穩(wěn)固固定和精確的位置調(diào)整；2、改進液壓連接系統(tǒng)：對液壓損傷模型中液壓沖擊顱腦損傷儀與小動物—大鼠的連接裝置進行改良，研制出連接嚴(yán)密、可適當(dāng)延長、壓力衰減小、易于排氣、操作簡便的連接裝置；3、大鼠立體定向控制液壓沖擊顱腦損傷模型的觀測：72只成年大鼠分為2組：實驗組(n=68)和對照組(n=4)。實驗組分為4個亞組，每組各17只大鼠。實驗組和對照組都進行標(biāo)準(zhǔn)化的手術(shù)步驟。對照組不進行液壓沖擊致傷，實驗組用液壓沖

4、擊致傷，試驗造成大鼠輕、中、重三型腦損傷模型，進行生命體征監(jiān)測、神經(jīng)行為學(xué)評分、MRI檢查、腦片TTC染色、大體標(biāo)本觀測和病理切片觀察。 結(jié)果:本研究開發(fā)的小動物立體定向控制儀能適應(yīng)各種方向、多種角度、可旋轉(zhuǎn)調(diào)節(jié)的要求，該裝置能夠在動物清醒狀態(tài)下對其進行穩(wěn)固固定和精確的位置調(diào)整，并能在固定大鼠后直接度數(shù)算出其齒耳線的長度。本研究測量了200-300gWistar大鼠右頂部冠狀縫后2.5mm、矢狀縫旁2mm處顱腔的垂直深度與齒耳線

5、長度的比例，發(fā)現(xiàn)這一比例較為恒定，平均為0.329，這樣我們在明確了齒耳線長度后，可以利用這一相對恒定的比例推測相應(yīng)部位的顱腔深度，在此基礎(chǔ)上借助相關(guān)公式就能精確推導(dǎo)出打擊點和打擊傷道的位置。在重型損傷模型中，通過對打擊角度改變前、后的C、D組動物的比較研究證實，順時針旋轉(zhuǎn)30度可使打擊傷道經(jīng)過腦干，對沖點部位向左越過中線達左側(cè)腦底部。D組死亡率高達23.53％，顯著高于同樣打擊力度(但打擊方向垂直)的C組(4％)。 改進的液壓

6、連接系統(tǒng)連接嚴(yán)密、可適當(dāng)調(diào)整長度、壓力衰減小、易于排氣、操作簡便。借助上述系統(tǒng)建立的大鼠顱腦損傷模型具有損傷部位精確、致傷程度穩(wěn)定、重復(fù)性好、個體隨機誤差小的特點。規(guī)范操作流程對提高動物模型精度和穩(wěn)定性極為重要。 本研究采用腦片TTC染色較好地顯示了腦創(chuàng)傷后損傷區(qū)范圍及傷道走行，與同期MRI及HE染色觀測顯示的改變一致。本研究的系列研究還證實：打擊力越大，損傷越重，損傷后死亡率越高，行為學(xué)評分越低，腦水腫程度越重，腦挫裂傷灶和M

7、RI影像學(xué)改變越明顯。完全可以滿足進一步研究觀察的需要。結(jié)論可靠穩(wěn)定的動物固定、精確的打擊部位和打擊方向的控制、良好的簡便嚴(yán)密的液壓連接是保障小動物創(chuàng)傷實驗?zāi)Ｐ唾|(zhì)量的關(guān)鍵。在改進液壓沖擊顱腦損傷系統(tǒng)硬件性能的同時，嚴(yán)格地標(biāo)準(zhǔn)化操作是減少隨機誤差的重要保障。 腦片TTC染色是觀察創(chuàng)傷后腦損傷、腦水腫的有效指標(biāo)，對判斷創(chuàng)傷傷道具有獨特的優(yōu)勢，可以為腦創(chuàng)傷動物模型研究提供一種簡便、經(jīng)濟的、可靠的輔助觀測方法。 借助本研究改進的