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文檔簡介
1、【目的】創(chuàng)傷性腦損傷(Traumatic brain injury,TBI)后存在著原發(fā)和繼發(fā)兩種病理改變。自由基損傷和神經元凋亡是引起TBI后繼發(fā)性腦損傷的重要原因。蒲公英(taraxacum mongo,TM)是菊科多年生草本植物,具有廣譜抗菌、抗突變、抗腫瘤、抗氧化等多種藥理作用。本實驗通過建立大鼠顱腦損傷模型,觀察蒲公英對急性創(chuàng)傷性腦損傷的治療作用,并探討該藥的作用機制與超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX
2、)以及海馬CA1區(qū)的神經細胞凋亡的關系,為蒲公英的應用和進一步開發(fā)奠定理論和實驗基礎。
【方法】雄性SD大鼠144只,隨機分成以下6組:正常對照組、假手術組、腦創(chuàng)傷組、蒲公英低劑量治療組(LDT組),蒲公英中劑量治療組(MDT組)、蒲公英高劑量治療組(HDT組),每組24只大鼠。采用Marmarou法制造大鼠重型彌漫性顱腦創(chuàng)傷模型。分別采用生物化學、HE染色法和原位末端標記TUNEL法,觀察蒲公英對大鼠腦組織中的丙二醛含量(M
3、DA)、SOD活性、GSH-PX活性、海馬CA1區(qū)損傷和海馬CA1區(qū)的神經細胞凋亡情況的影響。
【結果】1.腦創(chuàng)傷組鏡下可見大鼠海馬CA1區(qū)神經元細胞排列較紊亂,數目減少,出現廣泛的水腫和變性壞死神經元,神經元胞體腫脹,細胞核深染,結構不清,部分細胞核固縮呈塊狀,部分細胞出現空泡樣變性,間質水腫明顯,與Marmarou所描述的模型表現大致相符。蒲公英低、中、高劑量組均能不同程度的改善神經細胞的核深染及核固縮程度,減少細胞及間質
4、的水腫。形態(tài)正常,核仁清晰可見的神經細胞數目增多。蒲公英高劑量治療組海馬CA1區(qū)大鼠海馬結構完整,神經細胞形態(tài)基本正常,偶見核深染或固縮現象,細胞排列較規(guī)整緊密,未見明顯的神經細胞脫失情況。
2.與正常對照組、假手術組比較,創(chuàng)傷組大鼠腦組織含水量均明顯增加,差異有顯著性(P<0.01);與創(chuàng)傷對照組比較,LDT和MDT大鼠在蒲公英治療3d后,其腦組織含水量減少,差異有顯著性(P<0.05);與創(chuàng)傷對照組相比較,HDT組大鼠腦含
5、水量明顯減少,差異有顯著性(P<0.01)。提示蒲公英能夠明顯減輕急性創(chuàng)傷性大鼠的腦水腫程度,對腦創(chuàng)傷有一定保護作用,且呈劑量依賴性。
3.與正常對照組、假手術組比較,創(chuàng)傷組大鼠腦組織中MDA含量均明顯升高,差異有顯著性(P<0.01);與創(chuàng)傷對照組比較,LDT、MDT組大鼠在蒲公英治療3d后,其腦組織MDA含量減少,差異有顯著性(P<0.05);與創(chuàng)傷對照組比較,HDT組大鼠腦組織MDA含量明顯減少,差異有顯著性(P<0.0
6、1)。提示中、小劑量的蒲公英能夠抑制創(chuàng)傷性大鼠腦組織MDA含量的升高,大劑量的蒲公英能夠明顯抑制創(chuàng)傷性大鼠腦組織MDA含量的升高。
4.與正常對照組、假手術組比較,創(chuàng)傷組大鼠腦組織中SOD活性均明顯下降,差異有顯著性(P<0.01);與創(chuàng)傷對照組比較,LDT、MDT組大鼠在蒲公英治療3d后,其腦組織SOD活性升高,差異有顯著性(P<0.05);與創(chuàng)傷對照組比較,HDT組大鼠腦組織SOD活性明顯升高,差異有顯著性(P<0.01)
7、。提示中、小劑量的蒲公英能夠促進創(chuàng)傷性大鼠腦組織SOD活性的升高,大劑量的蒲公英能夠明顯促進創(chuàng)傷性大鼠腦組織SOD活性的升高。
5.與正常對照組、假手術組比較,創(chuàng)傷組大鼠腦組織中GSH-PX活性均明顯下降,差異有顯著性(P<0.01);與創(chuàng)傷對照組比較,LDT、MDT組大鼠在蒲公英治療3d后,其腦組織GSH-PX活性升高,差異有顯著性(P<0.05);與創(chuàng)傷對照組比較,HDT組大鼠腦組織GSH-PX活性明顯升高,差異有顯著性(
8、P<0.01)。提示中、小劑量的蒲公英能夠促進創(chuàng)傷性大鼠腦組織GSH-PX活性的升高,大劑量的蒲公英能夠明顯促進創(chuàng)傷性大鼠腦組織GSH-PX活性的升高。
6.TUNEL檢測結果:正常對照組和假手術組,大鼠海馬CA1區(qū)偶見TUNEL陽性凋亡細胞。腦創(chuàng)傷組,傷后3d大鼠海馬CA1區(qū)出現大量的TUNEL陽性凋亡細胞,鏡下陽性細胞核著藍紫色。同創(chuàng)傷組相比,蒲公英小、中、高劑量治療組的凋亡細胞數量明顯下調,差異有顯著意義(P<0.05)
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