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文檔簡(jiǎn)介
1、【目的】創(chuàng)傷性腦損傷(Traumatic brain injury,TBI)后存在著原發(fā)和繼發(fā)兩種病理改變。自由基損傷和神經(jīng)元凋亡是引起TBI后繼發(fā)性腦損傷的重要原因。蒲公英(taraxacum mongo,TM)是菊科多年生草本植物,具有廣譜抗菌、抗突變、抗腫瘤、抗氧化等多種藥理作用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立大鼠顱腦損傷模型,觀察蒲公英對(duì)急性創(chuàng)傷性腦損傷的治療作用,并探討該藥的作用機(jī)制與超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX
2、)以及海馬CA1區(qū)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡的關(guān)系,為蒲公英的應(yīng)用和進(jìn)一步開發(fā)奠定理論和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【方法】雄性SD大鼠144只,隨機(jī)分成以下6組:正常對(duì)照組、假手術(shù)組、腦創(chuàng)傷組、蒲公英低劑量治療組(LDT組),蒲公英中劑量治療組(MDT組)、蒲公英高劑量治療組(HDT組),每組24只大鼠。采用Marmarou法制造大鼠重型彌漫性顱腦創(chuàng)傷模型。分別采用生物化學(xué)、HE染色法和原位末端標(biāo)記TUNEL法,觀察蒲公英對(duì)大鼠腦組織中的丙二醛含量(M
3、DA)、SOD活性、GSH-PX活性、海馬CA1區(qū)損傷和海馬CA1區(qū)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況的影響。
【結(jié)果】1.腦創(chuàng)傷組鏡下可見(jiàn)大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元細(xì)胞排列較紊亂,數(shù)目減少,出現(xiàn)廣泛的水腫和變性壞死神經(jīng)元,神經(jīng)元胞體腫脹,細(xì)胞核深染,結(jié)構(gòu)不清,部分細(xì)胞核固縮呈塊狀,部分細(xì)胞出現(xiàn)空泡樣變性,間質(zhì)水腫明顯,與Marmarou所描述的模型表現(xiàn)大致相符。蒲公英低、中、高劑量組均能不同程度的改善神經(jīng)細(xì)胞的核深染及核固縮程度,減少細(xì)胞及間質(zhì)
4、的水腫。形態(tài)正常,核仁清晰可見(jiàn)的神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目增多。蒲公英高劑量治療組海馬CA1區(qū)大鼠海馬結(jié)構(gòu)完整,神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)基本正常,偶見(jiàn)核深染或固縮現(xiàn)象,細(xì)胞排列較規(guī)整緊密,未見(jiàn)明顯的神經(jīng)細(xì)胞脫失情況。
2.與正常對(duì)照組、假手術(shù)組比較,創(chuàng)傷組大鼠腦組織含水量均明顯增加,差異有顯著性(P<0.01);與創(chuàng)傷對(duì)照組比較,LDT和MDT大鼠在蒲公英治療3d后,其腦組織含水量減少,差異有顯著性(P<0.05);與創(chuàng)傷對(duì)照組相比較,HDT組大鼠腦含
5、水量明顯減少,差異有顯著性(P<0.01)。提示蒲公英能夠明顯減輕急性創(chuàng)傷性大鼠的腦水腫程度,對(duì)腦創(chuàng)傷有一定保護(hù)作用,且呈劑量依賴性。
3.與正常對(duì)照組、假手術(shù)組比較,創(chuàng)傷組大鼠腦組織中MDA含量均明顯升高,差異有顯著性(P<0.01);與創(chuàng)傷對(duì)照組比較,LDT、MDT組大鼠在蒲公英治療3d后,其腦組織MDA含量減少,差異有顯著性(P<0.05);與創(chuàng)傷對(duì)照組比較,HDT組大鼠腦組織MDA含量明顯減少,差異有顯著性(P<0.0
6、1)。提示中、小劑量的蒲公英能夠抑制創(chuàng)傷性大鼠腦組織MDA含量的升高,大劑量的蒲公英能夠明顯抑制創(chuàng)傷性大鼠腦組織MDA含量的升高。
4.與正常對(duì)照組、假手術(shù)組比較,創(chuàng)傷組大鼠腦組織中SOD活性均明顯下降,差異有顯著性(P<0.01);與創(chuàng)傷對(duì)照組比較,LDT、MDT組大鼠在蒲公英治療3d后,其腦組織SOD活性升高,差異有顯著性(P<0.05);與創(chuàng)傷對(duì)照組比較,HDT組大鼠腦組織SOD活性明顯升高,差異有顯著性(P<0.01)
7、。提示中、小劑量的蒲公英能夠促進(jìn)創(chuàng)傷性大鼠腦組織SOD活性的升高,大劑量的蒲公英能夠明顯促進(jìn)創(chuàng)傷性大鼠腦組織SOD活性的升高。
5.與正常對(duì)照組、假手術(shù)組比較,創(chuàng)傷組大鼠腦組織中GSH-PX活性均明顯下降,差異有顯著性(P<0.01);與創(chuàng)傷對(duì)照組比較,LDT、MDT組大鼠在蒲公英治療3d后,其腦組織GSH-PX活性升高,差異有顯著性(P<0.05);與創(chuàng)傷對(duì)照組比較,HDT組大鼠腦組織GSH-PX活性明顯升高,差異有顯著性(
8、P<0.01)。提示中、小劑量的蒲公英能夠促進(jìn)創(chuàng)傷性大鼠腦組織GSH-PX活性的升高,大劑量的蒲公英能夠明顯促進(jìn)創(chuàng)傷性大鼠腦組織GSH-PX活性的升高。
6.TUNEL檢測(cè)結(jié)果:正常對(duì)照組和假手術(shù)組,大鼠海馬CA1區(qū)偶見(jiàn)TUNEL陽(yáng)性凋亡細(xì)胞。腦創(chuàng)傷組,傷后3d大鼠海馬CA1區(qū)出現(xiàn)大量的TUNEL陽(yáng)性凋亡細(xì)胞,鏡下陽(yáng)性細(xì)胞核著藍(lán)紫色。同創(chuàng)傷組相比,蒲公英小、中、高劑量治療組的凋亡細(xì)胞數(shù)量明顯下調(diào),差異有顯著意義(P<0.05)
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