四川地區(qū)豬大腸桿菌的耐藥性檢測(cè).pdf

1、大腸埃希氏菌(Escherichia coli)簡(jiǎn)稱大腸桿菌，是人和動(dòng)物腸道中最豐富的一種細(xì)菌。大腸桿菌多數(shù)菌株不具有致病性，但在一定條件下可引起腸道外感染。而某些血清型菌株致病力強(qiáng)，可引起人和多種動(dòng)物的疾病，常常導(dǎo)致腹瀉和敗血癥，并可發(fā)生致死性感染。臨床上使用抗生素進(jìn)行大腸桿菌病的治療，但近年來(lái)隨著抗生素的大量運(yùn)用，多重耐藥大腸桿菌菌株日益增多，給人和動(dòng)物的安全帶來(lái)了極大隱患。為掌握四川省規(guī)模化豬場(chǎng)大腸桿菌的耐藥特性，本研究對(duì)采集于四

2、川省多個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)的樣品進(jìn)行了大腸桿菌的分離鑒定和耐藥性分析，對(duì)氟喹諾酮耐藥細(xì)菌進(jìn)行了耐藥基因的檢測(cè)，為四川省規(guī)?；i場(chǎng)大腸桿菌病毒防控提供了科學(xué)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
　　1、規(guī)模化豬場(chǎng)大腸桿菌的分離與鑒定
　　在四川省規(guī)?；i場(chǎng)采集發(fā)病豬的糞便或肝臟等組織樣品，采用常規(guī)細(xì)菌分離技術(shù)分離發(fā)病豬組織中的大腸桿菌，通過(guò)形態(tài)學(xué)、培養(yǎng)特性和生化特性對(duì)分離菌進(jìn)行鑒定。使用小鼠作為動(dòng)物模型，對(duì)分離均進(jìn)行致病力分析，結(jié)果鑒定出198株大腸桿菌，其

3、中26株分離均具有致病性，腹腔感染小鼠后可引起小鼠死亡。
　　2、198株大腸桿菌對(duì)9種非喹諾酮和9種喹諾酮藥物的耐藥性分析
　　按照CLSI推薦的Kirby-Bauer法，進(jìn)行18種抗菌藥物的藥敏試驗(yàn)，結(jié)果顯示，非喹諾酮藥物中氟苯尼考耐藥率最高為94.95％(188/198)，阿米卡星耐藥率最低為23.23％(46/198);喹諾酮藥物中恩諾沙星耐藥率最高為87.88％(174/198)，左氧氟沙星耐藥率最低為71.21％

4、(141/198)。不同地區(qū)分離的大腸桿菌耐藥性有差異。分離自不同地區(qū)的耐藥率也有差異，多重耐藥率比較高，15、16、17重耐藥最為嚴(yán)重，分別有26、32和38株。
　　3、198株大腸桿菌喹諾酮耐藥基因的檢測(cè)
　　根據(jù)喹諾酮耐藥基因序列設(shè)計(jì)擴(kuò)增qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrS、aac(6')-Ib、qepA等基因的引物對(duì)所有分離菌進(jìn)行耐藥基因的PCR檢測(cè)。結(jié)果顯示，198株分離菌株均沒(méi)有檢測(cè)出qnrC基因，

5、qnrA基因檢出率11.11％(22/198)，qnrB基因檢出率7.58％(15/198)，qnrS基因檢出率9.09％(18/198)，qnrD基因檢出率1.01％(2/198)，aac(6')-Ib-cr基因檢出率12.12％(24/198)，qepA基因檢出率4.04％(8/198)。以上研究結(jié)果顯示四川省規(guī)?；i場(chǎng)中豬源大腸桿菌耐藥性嚴(yán)重且存在多重耐藥現(xiàn)象。四川省豬源大腸桿菌喹諾酮耐藥性與質(zhì)粒介導(dǎo)的qnrA、qnrB、qnrS