Leber氏遺傳性視神經(jīng)病變一個雙生子家系的臨床和分子遺傳學研究.pdf

1、目的：探討Leber氏遺傳性視神經(jīng)病變(LHON)一個雙生子家系的臨床和分子遺傳學特征，對該家系LHON發(fā)病的一般臨床情況及其臨床發(fā)病特點、遺傳方式、線粒體基因突變的類型和影響LHON發(fā)病的可能因素進行詳盡的研究和分析。 方法：對LHON一個家系進行詳盡的家系調(diào)查和病史詢問，分析其遺傳特征和發(fā)病特點(包括發(fā)病的年齡、性別、起病方式、雙眼起病先后、視力損傷程度以及是否合并有眼外的其他系統(tǒng)疾病)，并對先證者及其母系親屬進行眼科臨床檢

2、查，包括視力、視野、眼底及電生理檢查，再進行線粒體基因突變的檢測，即抽取靜脈血自全血提取線粒體DNA(mtDNA)，應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)，分別擴增mtDNA上相應(yīng)片段檢測G3460A、G11778A和T14484C位點突變，對三個不同片段的PCR產(chǎn)物進行基因測序以檢測mtDNA上是否存在這三個位點突變。最后應(yīng)用分子遺傳學技術(shù)對該家系中的一對雙生子進行DNA多態(tài)性的比較分析以鑒定其卵性。雙生子二人各抽取外周靜脈血lml，用che

3、lex法抽提樣本DNA，用PCR擴增樣本DNA，PAG垂直電泳分型，銀染法測定10個STR位點的基因型，再對二人的10個STR位點基因型進行比較分析以確定其是否一致。 結(jié)果：該家系32個母系親屬中，10人發(fā)病，男性發(fā)病率為46．7％，女性發(fā)病率為16．7％。各患者視力下降程度各不相同：視力損害達1級的有3人，占30％；視力損害達2級的有1人，占10％；視力損害達3級的有1人，占10％；視力損害達4級的有5人，占50％。這10人中

4、7人有色覺異常，均表現(xiàn)為紅綠色盲。發(fā)病年齡6～45歲，其中<15歲者3例，15～20歲者5例，>20歲者2例；平均發(fā)病年齡(18．30±n．22)歲，男性平均發(fā)病年齡(14．42±5．32)歲，女性平均發(fā)病年齡(27．33~17．50)歲。雙眼同時發(fā)病3例，先后發(fā)病7例。該家系的一些成員臨床表現(xiàn)為嚴重的視力下降、色覺異常，視野檢查見巨大中心暗點，視覺誘發(fā)電位(VEP)檢查結(jié)果顯示雙眼P100波潛伏期延遲及振幅下降或消失，其遺傳方式顯示為

5、典型的母系遺傳特征，先證者IV-3及其胞弟IV-4和他們母親III一1、有視力損傷者IV-5及無視力下降者Ⅳ．7的mtDNA經(jīng)PCR擴增后的純化產(chǎn)物送去寶生物工程(大連)有限公司測序。測序結(jié)果進行分析后顯示該家系上述各成員的mtDNA均發(fā)現(xiàn)有G¨778A位點突變，而G3460A和T14484C位點突變陰性。雙生子IV-3與IV-4在10個STR位點的基因型不一致，基本上可以排除其同卵雙生的可能，因此認為雙生子IV-3與IV-4是異卵雙生