三個常染色體顯性遺傳性耳聾家系和一個聽神經(jīng)病家系致病基因的鑒定研究.pdf

1、耳聾是臨床上最常見的遺傳性疾病之一。引起耳聾的常見病因中,環(huán)境因素約占20-40％,遺傳因素約占60-80%。絕大多數(shù)的遺傳性耳聾為單基因缺陷致病。
　　本研究應(yīng)用全外顯子組測序技術(shù)對三個常染色體顯性遺傳性耳聾家系進行致聾基因的鑒定,運用經(jīng)典的候選基因測序技術(shù)對一個聽神經(jīng)病家系的致病基因進行鑒定。發(fā)現(xiàn)了1個潛在的耳聾新基因WYF1,DFNA5的1個新致病性突變p.E375X,和OTOF基因的2個新致病性突變p.L517P和p.I1

2、967del。同時,對檢測到的新致聾基因WYF1應(yīng)用斑馬魚模型進行了初步的致病機制研究。現(xiàn)將本研究概述如下:
　　第一部分三個常染色體顯性遺傳性耳聾家系的臨床特征及致病基因鑒定研究
　　FJ-C199家系為五代67人的耳聾大家系,患病成員癥狀以進行性加重的耳聾、耳鳴為主,部分成員伴有先天性斜視或眼震。多數(shù)患者于9-15歲出現(xiàn)聽力下降,最遲發(fā)病年齡為50歲左右,符合常染色體顯性遺傳性耳聾的特征。該家系的耳聾與眼震表型分別由不同

3、致病基因?qū)е禄蛴赏恢虏』蛞鹕袩o定論。
　　應(yīng)用全外顯子組測序技術(shù)進行致病基因篩查,檢測到 WYF1基因的p.D326AfsX42移碼突變與耳聾表型共分離。WYF1為轉(zhuǎn)錄因子,在鼠、斑馬魚和雞胚的耳泡和眼泡中均有表達。9例攜帶WYF1基因突變的患者均有言語障礙,并伴有耳畸形和或聽力損失,部分患者眼發(fā)育異常。
　　GD-H238家系共5代,聽力下降者19人。聽力學表現(xiàn)為雙側(cè)對稱的進行性加重的高頻感音神經(jīng)性耳聾。該家系內(nèi)2個

4、不同分支聽力下降時間分別為10-30歲和60歲(分別稱為A組和B組)。A組符合常染色體顯性遺傳感音神經(jīng)性耳聾特點, B組符合顯性遺傳老年性聾特點。
　　應(yīng)用全外顯子組測序技術(shù)對GD-H238家系A(chǔ)組成員進行致病基因篩查,已知耳聾基因DFNA5第8外顯子的p.E375X無義突變與該家系耳聾表型共分離,提示該突變?yōu)镚D-H238家系A(chǔ)組患病成員的致病性突變。目前發(fā)現(xiàn)的DFNA5基因的4個致病性突變均位于第7內(nèi)含子。本課題組檢測到的第8

5、外顯子無義突變p.E375X,是迄今發(fā)現(xiàn)的第一個發(fā)生于外顯子的致病性突變,這將對DFNA5致病機制的探討和理解產(chǎn)生重要意義。
　　HB-Z177家系是一個共五代的常染色體顯性遺傳非綜合征型感音神經(jīng)性耳聾家系,患病成員合計10人,現(xiàn)存7人,發(fā)病年齡10-30歲。應(yīng)用全外顯子組測序?qū)ο茸C者基因組DNA進行測序,對發(fā)現(xiàn)的3個已知耳聾基因突變位點及4個可疑變異位點進行篩查,未發(fā)現(xiàn)陽性位點,提示其致聾基因可能為新的致聾基因。擬增加1-2個樣

6、品行全外顯子組測序,以快速鑒定出該家系的致聾基因。
　　第二部分常染色體顯性遺傳性耳聾新基因WYF1初步功能研究
　　WYF1為轉(zhuǎn)錄因子,在鼠、斑馬魚和雞胚的耳泡和神經(jīng)視網(wǎng)膜中均有表達。以斑馬魚作為研究模型,注射嗎啉代反義寡核苷酸多聚物后,嗎啉代突變體出現(xiàn)耳石融合、眼睛變小的現(xiàn)象,提示降低 WYF1蛋白的表達水平后,內(nèi)耳發(fā)育將出現(xiàn)異常,提示W(wǎng)YF1基因在內(nèi)耳和眼發(fā)育過程中起著重要作用。
　　第三部分常染色體隱性遺傳聽神