鹽酸小檗堿對紅色毛癬菌抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文鹽酸小檗堿對紅色毛癬菌抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究姓名：楊云申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：皮膚病與性病學(xué)指導(dǎo)教師：佟盼琢20090301中文摘要相同作用時間電鏡下鹽酸小檗堿對紅色毛癬菌的抑制情況和作用機(jī)理尚不完全清楚。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用MTT(3一(4，5一二甲基噻唑一2)一2，5一二苯基四氮唑溴鹽)微量稀釋法測定鹽酸小檗堿對紅色毛癬菌的抑菌作用，以及應(yīng)用掃描電鏡和透射電鏡觀察相同藥物濃度不同作用時間和不同藥物濃度相同作用時間電鏡下紅色

2、毛癬菌超微結(jié)構(gòu)的改變。方法：從足癬和甲真菌病患者的病變處取材，培養(yǎng)并分離出30株紅色毛癬菌，將菌株鑒定后接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，28℃培養(yǎng)710天。選擇生長良好的菌株，取lmL無菌O85％鹽水含有01％吐溫80，用巴氏吸管輕輕抽吸，產(chǎn)生孢子和菌絲段的混合物。將菌懸液放入研磨器研磨均勻。用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)孢子和菌絲數(shù)目，并調(diào)節(jié)接種物濃度在O4106cfu／mL～5106cfu／mL。將菌懸液用沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基1：50稀釋成2倍終

3、濃度。再將部分菌懸液用無菌O85％鹽水稀釋100倍，取O1mL接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂平皿中，28℃溫箱孵育，每天觀察，計(jì)數(shù)菌落。將鹽酸小檗堿用沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基倍比稀釋，使其濃度為1000ug／mL“78ug／mL。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用聚苯乙烯96孔酶標(biāo)板完成。藥液依次加入96孔酶標(biāo)板的1～8列中，各濃度藥液依次加入，配制過程中每一濃度梯度完成后應(yīng)更換吸頭。第9列為生長對照，加入100uL沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基，不含有抗真菌藥物。取200uL沙氏