地塞米松對(duì)紅色毛癬菌生物學(xué)性狀的影響.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:1.觀察地塞米松對(duì)紅色毛癬菌生長(zhǎng)、菌落產(chǎn)色及抗真菌藥物敏感性的影響,為臨床及時(shí)準(zhǔn)確的診斷和合理的用藥提供理論依據(jù)。2.探討紅色毛癬菌在地塞米松干預(yù)前后基因型的差異,從基因水平探討地塞米松影響下紅色毛癬菌表型特征發(fā)生變化的可能分子生物學(xué)機(jī)制。 方法:1.對(duì)臨床上經(jīng)分離鑒定的紅色毛癬菌首先采用大培養(yǎng)測(cè)定含不同濃度地塞米松沙氏培養(yǎng)基上菌落生長(zhǎng)直徑,并繪制生長(zhǎng)曲線,然后采用分光光度計(jì)測(cè)定含不同濃度地塞米松沙氏液體培養(yǎng)基的吸光度,最

2、后參照美國(guó)國(guó)家實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(NCCLSM-38A)方案,采用微量液基法檢測(cè)不同濃度地塞米松干預(yù)下特比萘芬對(duì)紅色毛癬菌的MIC變化。2.取在含不同濃度地塞米松培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的紅色毛癬菌,采用真菌通用引物ITS1、ITS4對(duì)其ITS區(qū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增,從分子水平對(duì)其進(jìn)行鑒定,經(jīng)鑒定的紅色毛癬菌進(jìn)一步對(duì)其NTS區(qū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增,觀察不同濃度地塞米松干預(yù)前后基因條帶的變化。 結(jié)果:1.從繪制的生長(zhǎng)曲線看,當(dāng)?shù)厝姿傻臐舛葹?.05%、0

3、.1%和0.2%時(shí),與對(duì)照組比較無(wú)明顯的變化,當(dāng)?shù)厝姿傻臐舛葹?.4%、0.8%時(shí)前五天對(duì)紅色毛癬菌生長(zhǎng)有明顯的抑制作用,其后促進(jìn)紅色毛癬菌的生長(zhǎng),當(dāng)?shù)厝姿傻臐舛葹?.0%時(shí)對(duì)紅色毛癬菌生長(zhǎng)有明顯的抑制作用。2.不含地塞米松組紅色毛癬菌的吸光度值(OD)幾何均數(shù)為0.117±0.032,特比萘芬MIC為0.063μg/ml,當(dāng)?shù)厝姿傻臐舛葹?.05%、0.1%和0.2%時(shí),紅色毛癬菌的OD幾何均數(shù)分別為0.118±0.032、0.

4、118±0.032和0.132±0.030,MIC分另為0.081μg/ml、0.092μg/ml和0.109μg/ml與空白組比較無(wú)明顯差異(P>0.05);當(dāng)其濃度為0.4%、0.8%時(shí),紅色毛癬菌的0D幾何均數(shù)分別為0.165±0.081、0.175±0.085,特比萘芬MIC分別為0.196μg/ml、0.319μg/ml與空白組比較有明顯的差異(P<0.05)。3.引物ITSl、ITS4在不同濃度地塞米松沙氏培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的紅色

5、毛癬菌均擴(kuò)增出一約690bp特異條帶,5株紅色毛癬菌用引物TrNTSF-2和TrNTSR-4擴(kuò)增TRS-1區(qū),分為Ⅱ型,用TrNTSR-1和TrNTSC-1擴(kuò)增TRS-2區(qū),可分為Ⅰ型,帶型均比較簡(jiǎn)單,但地塞米松干預(yù)前后帶型一致。 結(jié)論:1.低濃度的地塞米松(0.05%、0.1%和0.2%)對(duì)紅色毛癬菌的生長(zhǎng)、產(chǎn)色和抗真菌藥物的敏感性無(wú)明顯的影響,中等濃度時(shí)(0.4%、0.8%)促進(jìn)紅色毛癬菌的生長(zhǎng)和產(chǎn)色,且降低紅色毛癬菌對(duì)特比

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