建立LC-MS-MS法測(cè)定血漿中利培酮和硫普羅寧的濃度及應(yīng)用.pdf

1、生物樣本基質(zhì)復(fù)雜,樣本量大,采用特異性強(qiáng),靈敏度高的液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)不僅能避免內(nèi)源性物質(zhì)的干擾滿足我們的分析要求,而且能大大縮短分析時(shí)間,非常適合血漿中藥物濃度的測(cè)試。
　　第一部分建立LC-ESI(+)-MS/MS法測(cè)定人血漿中利培酮濃度并成功應(yīng)用于利培酮分散片在30名健康受試者的生物等效性研究。以地西泮為內(nèi)標(biāo),在多反應(yīng)離子監(jiān)測(cè)模式下監(jiān)測(cè)利培酮和地西泮離子對(duì)分別為411.2/191.0,285.0/154.0。采用乙醚液-液萃取處理

2、樣品,血漿用量為0.5mL,UltimateC18色譜柱分離,流動(dòng)相為甲醇:5mmol/L乙酸銨(80:20,v/v)。該方法定量下限為0.100ng/mL,標(biāo)準(zhǔn)曲線在0.100~24.150ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。將DAS3.0計(jì)算的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)結(jié)果進(jìn)行方差分析和群體等效性分析,雙向單側(cè)t檢驗(yàn)和[1-2α]％置信區(qū)間。結(jié)果表明,受試制劑AUC0-24、AUCi的[1-2a]置信區(qū)間為,82.5%~102.9%,81.5%~10

3、2.2%,均在80%~125%范圍內(nèi);Cmax的[1-2a]置信區(qū)間為77.1%~93.7%,在75%~133%范圍內(nèi)。受試制劑與參比制劑的Tmax經(jīng)非參數(shù)法檢驗(yàn)結(jié)果P>0.05無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩制劑具有生物等效性。
　　第二部分建立人血漿中硫普羅寧的LC-ESI(-)-MS/MS分析方法并成功應(yīng)用于硫普羅寧腸溶膠囊在22名健康受試者的生物等效性研究。以卡多曲代謝物DL-Thiorphan為內(nèi)標(biāo),監(jiān)測(cè)藥物和內(nèi)標(biāo)的離子對(duì)分別為161.

4、9/105.0;251.8/217.9,乙腈沉淀蛋白處理血漿樣品并加入L-半胱氨酸溶液、1,4-二硫代蘇糖醇溶液作為穩(wěn)定劑和還原劑避免硫普羅寧被氧化。在乙腈:0.1%的乙酸水溶液(60:40,v/v)為流動(dòng)相條件下進(jìn)樣5μL分析。該方法靈敏度為3.888ng/mL,能滿足絕大部分樣本的分析要求,每個(gè)樣本分析時(shí)間為3.0min。采用DAS3.0軟件計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù),對(duì)AUC0-96、AUCi、Cmax對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后進(jìn)行方差分析、群體等效性分