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1、原發(fā)性肝癌發(fā)病率在人類惡性腫瘤中排名第五,是一類嚴(yán)重危害人類生命健康的疾病.該研究采用表達(dá)HCVNS3 N端多肽的真核表達(dá)質(zhì)粒(pRcHCNS3-5')和相應(yīng)的空白質(zhì)粒(pRcCMV)通過脂質(zhì)體介導(dǎo)分別轉(zhuǎn)染永生化的正常人肝細(xì)胞L02和猴腎上皮細(xì)胞COS7,G418篩選后,挑選其陽性克隆用Western Blotting檢測(cè)兩種轉(zhuǎn)染細(xì)胞NS3表達(dá),結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染了HCVNS3-5'基因的L02及COS7細(xì)胞克隆有一條與NS3蛋白分子量相同的
2、30KD電泳帶,成功建立了穩(wěn)定表達(dá)HCVNS3-5'基因的L02和COS7細(xì)胞系(L02NS3、COS7NS3),以及空白質(zhì)粒pRcCMV轉(zhuǎn)染的對(duì)照組細(xì)胞系(L02Vec、COS7Vec).然后對(duì)上述細(xì)胞系的生物學(xué)特性進(jìn)行了觀察該研究證實(shí)HCVNS3能惡性轉(zhuǎn)化正常人肝細(xì)胞L02和猴腎上皮細(xì)胞COS7,為研究HCV致人肝細(xì)胞癌作用及其機(jī)制提供了更直接的有力證據(jù)和體外模型.該研究識(shí)別鑒定的HCVNS3轉(zhuǎn)化人肝細(xì)胞與對(duì)照組細(xì)胞之間的差異表達(dá)蛋
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