高惡性膀胱移行細(xì)胞癌的蛋白質(zhì)組學(xué)研究及mortalin的表達(dá)驗證.pdf

1、天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文高惡性膀胱移行細(xì)胞癌的蛋白質(zhì)組學(xué)研究及mtalin的表達(dá)驗證姓名：趙麗申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：張淑敏20090501天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文2利用MALDITOF／TOFMS儀結(jié)合數(shù)據(jù)庫檢索對上述20個蛋白點(diǎn)進(jìn)行鑒定。最后得到符合條件的差異表達(dá)蛋白11個，其中mortalin、角蛋白7(CK7)、微管蛋白B4(Tubulinbeta111)、抑制素(Prohibitin)、膜聯(lián)蛋白IV

2、(AnnexinA4)、蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶A6前體蛋白(PD認(rèn)6)、HSP60在腫瘤組織中表達(dá)上調(diào)；角蛋白8(CK8)、1433￡蛋白、膜聯(lián)蛋白V(AnnexinA5)、結(jié)蛋白(Desmin)在腫瘤組織中表達(dá)下調(diào)。運(yùn)用蛋白數(shù)據(jù)庫和文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫的大量信息，對上述11種蛋白進(jìn)行相關(guān)信息的匯總分析，其中5個蛋白在文獻(xiàn)中曾經(jīng)報道過，其表達(dá)失調(diào)與膀胱癌的發(fā)生發(fā)展可能相關(guān)；其余6個蛋白目前尚未見到與膀胱癌的相關(guān)報道，包括：mortalin、1433￡

3、蛋白、蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶A6前體蛋白、膜聯(lián)蛋白Ⅳ、結(jié)蛋白、微管蛋白B4。3半定量RTPCR和免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示mortalin在高惡性膀胱移行細(xì)胞癌中mRNA和蛋白表達(dá)水平均高于正常膀胱移行上皮(PO01)，與2DE變化趨勢一致。同時免疫組化證實(shí)mortalin主要定位在腫瘤細(xì)胞和移行上皮細(xì)胞的胞漿中。擴(kuò)展的免疫組化研究表明：在膀胱移行細(xì)胞癌中mortalin的高表達(dá)與腫瘤的病理分級(RjO601，P001)和TNM分期(R蘆0021

4、，P005)相關(guān)，mortalin的表達(dá)與其他臨床病理特征，如腫瘤大小、部位、數(shù)目等未見明顯相關(guān)。結(jié)論1聯(lián)合應(yīng)用手工顯微切割與蛋白組學(xué)技術(shù)，成功建立了高惡性膀胱移行細(xì)胞癌與相應(yīng)正常膀胱移行上皮差異蛋白組學(xué)的研究方法。2高惡性膀胱移行細(xì)胞癌的蛋白表達(dá)譜與相應(yīng)正常的膀胱移行上皮組織相比有明顯差異，經(jīng)質(zhì)譜鑒定了“個差異表達(dá)蛋白，表明膀胱移行細(xì)胞癌的發(fā)生是一個多基因多途徑參與的復(fù)雜過程。3Mortalin蛋白在高惡性膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)明顯上