骨髓源性EPCs對脊髓源性NSCs增殖分化的影響.pdf

1、目的：觀察骨髓源性EPCs（EPCs)對脊髓源性NSCs（NSCs）增殖分化的影響。
　　方法：通過密度梯度離心法獲取骨髓血單個核細胞以EBM-2進行誘導(dǎo)培養(yǎng) EPCs并進行免疫細胞化學(xué)染色鑒定，成熟的方法獲取及鑒定SD大鼠的脊髓NSCs，1×105/ml第3代NSCs置于Transwell小室下層與1×105/ml上層原代EPCs進行體外1∶1共培養(yǎng)，以單純第3代的NSCs培養(yǎng)為對照，培養(yǎng)7 d，雙盲法分別計數(shù)各組在相差顯微鏡下

2、神經(jīng)球形成的數(shù)目，并用目鏡測微尺測量神經(jīng)球的平均直徑，通過5％血清誘導(dǎo)培養(yǎng)NSCs7 d后，行β-微管蛋白-Ⅲ免疫熒光染色，Hoechst細胞核染色后在顯微鏡下計算神經(jīng)元/細胞總數(shù)得出百分率。
　　結(jié)果：骨髓源性EPCs與脊髓源性NSCs共培養(yǎng)組神經(jīng)球平均數(shù)目為（22.27±3.85）個，平均直徑為（61.70±7.21）μm，誘導(dǎo)培養(yǎng)后分化為神經(jīng)元的平均百分率為（46.10+3.70）%，與對照組相比差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.