臍帶源與骨髓源干細胞移植治療大鼠脊髓損傷的療效比較.pdf

1、目的：脊髓損傷后治療修復的研究一直是神經科學領域的熱點和難點。近年來，間充質干細胞在神經組織的修復、再生和功能重建中所起的促進作用日益引起關注。骨髓間充質干細胞(BMSCs)、臍帶間充質細胞等均已被作為細胞來源用于脊髓損傷的神經修復，并顯示其有促進神經再生及改善動物神經恢復的功能。但作為間充質干細胞(MSCs)經典來源的骨髓組織移植效果不盡如人意，可能由于其隨年齡老化而致干細胞含量及其增殖能力顯著降低。因此，尋找新的MSCs來源有著重要

2、意義。我們最近從易于獲得、組織來源上較為原始的人臍帶組織中分離的MSCs，它的優(yōu)勢在于：①取材方便，易于獲得：②無倫理和道德等方面的障礙；③分離得到的細胞形態(tài)、表型相對均一；④臍帶內的MSCs含量高，且細胞增殖能力穩(wěn)定，可在短時間內獲得足夠的細胞；⑤人臍帶間充質干細胞(HUCMSCs)不表達HLA-DR分子，免疫源性較弱。本研究旨在觀察HUCMSCs和大鼠BMSCs移植到大鼠脊髓損傷模型后神經功能恢復的情況和移植后的免疫排斥反應，為細胞

3、移植尋找一種新型的具有良好應用前景的細胞來源提供理論依據(jù)，進而為其在脊髓損傷治療中應用奠定基礎。
　　 方法：
　　 1．獲取健康、足月、剖腹產胎兒臍帶，采用胰酶消化法獲取HUCMSCs。
　　 2．選取大鼠（約150克，雌雄不限），無菌條件下分離股骨脛骨，用密度梯度離心結合貼壁培養(yǎng)法分離純化大鼠BMSCs。
　　 3．選取同一批次的SD大鼠40只。采用隨機數(shù)字表法分成3組：臍帶間充質干細胞移植組16只、

4、骨髓間充質干細胞移植組16只和PBS組8只。采用脊髓半切手術制作大鼠脊髓損傷模型，損傷后對臍帶間充質干細胞移植組進行HUCMSCs移植，對骨髓間充質干細胞移植組行大鼠BMSCs移植，對PBS組移植同等劑量的PBS。通過BBB評分對各組動物的術后恢復進行評估比較。抽血測定移植后3組動物不同時間點（移植后一周、一個月、兩個月及三個月）血中IL-2及IL-10的水平，來對比各組動物移植后全身免疫排斥反應的情況；并通過免疫組化的方法檢測移植局部

5、病理切片CD3+細胞浸潤的情況，對比移植局部移植局部免疫排斥反應的情況。
　　 結果：
　　 1．大鼠BMSCs具有與HUCMSCs相似的生長周期與規(guī)律，但增殖與分化速度明顯慢于HUCMSCs，穩(wěn)定性與后者相比較差。
　　 2．在移植后一周、一個月、兩個月及三個月時，我們檢測到干細胞移植組各個時間點大鼠靜脈血中Ⅱ-2水平較PBS組明顯升高，Ⅱ-10水平較對照組明顯下降，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。

6、　　 3．大鼠骨髓間充質干細胞移植組在移植后一周、一個月、兩個月及三個月時大鼠靜脈血中Ⅱ-2水平較人臍帶間充質干細胞移植組明顯升高，Ⅱ-10水平較對照組明顯下降，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 4．三組在急性期（細胞移植后1周）移植局部均有大量CD3+細胞浸潤。而移植的慢性期（細胞移植后3個月）大鼠骨髓間充質干細胞移植組仍存在大量CD3+細胞浸潤，與其它兩組相比差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 結