嗅神經鞘細胞和硝普鈉對脊髓源性神經干細胞的增殖、分化及生長的作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、近年來,脊髓損傷(spinal cord injure,SCI)的再生修復研究取得了很大的進展.細胞移植被認為是最有前景的方法之一.細胞移植治療SCI焦點主要集中移植后細胞的定向分化和分化后細胞的軸突如何穿過SCI后修復所生成瘢痕.神經干細胞(neural stem cells,NSCs)和嗅神經鞘細胞(olfactory ensheathing cells,OECs)的移植最有希望解決上述問題.NSCs定向誘導為神經細胞,移植到損傷部

2、位,可以提供所需的種子細胞.OECs可以分泌多種細胞因子,促進神經元的存活及軸突的生成,還可以形成細胞索支架引導軸突穿過瘢痕,與靶細胞形成新的突觸,從而重新建立損傷部位細胞間的聯(lián)系,為恢復功能重建提供基礎.該實驗目的旨在定向誘導NSCs向神經元分化,研究OECs作為NSCs的"伴侶細胞",對NSCs存活、分化的作用,為進一步的細胞移植提供實驗基礎.一、硝普鈉對脊髓源性神經干細胞增殖抑制及誘導分化作用實驗從孕14d胎鼠的脊髓中培養(yǎng)出原代脊

3、髓源性的NSCs,在無血清的基礎培養(yǎng)液中培養(yǎng)純化3-5代鑒定后,加入終濃度為60μ mol/L,80 u mol/L,100μ mol/L的硝普鈉(sodium nitroprusside,SNP)溶液,培養(yǎng)48h,觀察神經NSCs的數量、形態(tài)變化.二、大鼠嗅神經鞘細胞支持小鼠脊髓源性神經干細胞的生長并誘導其分化采用原代培養(yǎng)方法從Sprague-Dawley大鼠嗅球分離培養(yǎng)OECs,接種于包被好的24孔板的12孔內,7d后,加入經純化的

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