PLGA-HA-PVA復合材料對hBMSCs向軟骨分化的體外實驗研究.pdf

1、目的:
　　探索hBMSCs接種于不同配比PLGA-HA-PVA復合三維支架材料上干細胞的分化情況。
　　方法:
　　制備PVA質量分數分別為15wt％、10wt％、5wt％PLGA-HA-PVA復合三維支架材料，其中PLGA為30wt％，HA為5wt％。支架上接種密度為1×106/mlhBMSCs的第3代傳代細胞。將上述材料分為誘導組及非誘導組(n=5)，根據分組分別加上hBMSCs軟骨誘導培養(yǎng)液或普通hBMSCs培

2、養(yǎng)液，并給每組設立空白對照組（含干細胞及培養(yǎng)液）。每3d換液一次，觀察支架周圍細胞生長情況，回收培養(yǎng)后7d、14d、21d時培養(yǎng)液行ELISA定量檢測Ⅱ型膠原及糖胺聚糖，培養(yǎng)21d后取復合材料行HE染色、免疫組化定性檢測Ⅱ型膠原。采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件對結果進行統(tǒng)計分析。
　　結果:
　　hBMSCs生長狀況良好，細胞貼壁，紡錘形或多角。在培養(yǎng)后21天復合物HE染色示誘導組有細胞外基質的分泌，Ⅱ型膠原免疫組化結果顯示誘

3、導組存在棕黃色顆粒;非誘導組HE染色未見明顯細胞外基質分泌，免疫組化示無明顯棕黃色顆粒，表示誘導組有Ⅱ型膠原表達。誘導組培養(yǎng)液中Ⅱ型膠原及糖胺聚糖的含量在PVA濃度為15wt％最高，PVA濃度為10wt％次之，PVA濃度為5wt％及空白對照組最低，差異具有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。非誘導組及非誘導空白對照組培養(yǎng)液中未測及Ⅱ型膠原及糖胺聚糖成分。
　　結論:
　　PVA濃度為15wt％或10wt％的PLGA-PVA-HA三維