Wnt1和Lgr5在卵巢上皮性癌的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:卵巢癌(ovarian cancer)是女性生殖器官三大惡性腫瘤之一，其中上皮性腫瘤是最常見的病理類型，其發(fā)病率次于子宮頸癌和子宮內(nèi)膜癌列居第三位，但致死率居婦科惡性腫瘤之首，嚴(yán)重威脅著婦女的生命和健康。在卵巢癌的早期階段，患者常無癥狀且缺乏有效的診斷手段，大部分患者確診時已處于疾病的晚期，經(jīng)治療后又因腫瘤的復(fù)發(fā)和化療耐藥，5年生存率仍低于30％。因此，解決早期診斷以及復(fù)發(fā)和化療耐藥等問題成為改善卵巢癌患者預(yù)后的關(guān)鍵。
　　

2、卵巢上皮性癌(Epithelial ovarian cancer, EOC)是一組高異質(zhì)性腫瘤，其組織來源尚不明確。腫瘤干細(xì)胞(Cancer Stem Cells，CSCs)假說是近年來提出的新理論，認(rèn)為腫瘤干細(xì)胞是存在于腫瘤組織中的一類細(xì)胞亞群，與正常干細(xì)胞相似，具有自我更新、多向分化潛能和無限增殖的特性，在腫瘤組織中所占比例極小，但卻是腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)和耐化學(xué)治療的根源。Wnt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路參與胚胎的生長、發(fā)育過程，調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化

3、、運(yùn)動及凋亡，并與干細(xì)胞的生長和腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，是一個在進(jìn)化上高度保守的復(fù)雜信號體系。Wnt基因家族的成員較多，Wnt1基因是該家族中最早被發(fā)現(xiàn)的一種原癌基因，其編碼的蛋白具有惡性轉(zhuǎn)化作用。目前國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，Wnt1蛋白是Wnt信號通路激活的重要參與者，還參與胚胎發(fā)育、器官形成等多種過程，其異常表達(dá)與人類多個系統(tǒng)發(fā)生的腫瘤有著密切的聯(lián)系。富含亮氨酸重復(fù)序列G-蛋白偶聯(lián)受體5(leucine-richrepeat-contain

4、ing G protein-coupled receptor5,Lgr5)，又名GPR49，是Wnt信號通路的靶向基因，也是G-蛋白偶聯(lián)受體家族的新成員，在大腦、脊髓、眼睛、毛囊、胃腸道及生殖器官等多種人體正常組織中呈散在表達(dá)。近幾年研究發(fā)現(xiàn)，Lgr5可作為小腸、結(jié)腸、毛囊、胃和腎等成體組織的干細(xì)胞標(biāo)記物，在多種腫瘤組織中過表達(dá)，為腫瘤干細(xì)胞的潛在標(biāo)記物之一，表明Lgr5的過表達(dá)狀態(tài)與腫瘤的發(fā)生有很大的關(guān)聯(lián)。
　　目前，關(guān)于Wnt

5、1和Lgr5在EOC中的研究報道較少。本研究通過免疫組織化學(xué)法檢測Wnt1和Lgr5蛋白在卵巢上皮性腫瘤組織中的表達(dá)情況，并探討其與臨床病理特征的關(guān)系以及二者的相關(guān)性，為EOC的診斷、治療和預(yù)后提供新的理論依據(jù)。
　　方法:運(yùn)用免疫組織化學(xué)PV法檢測18例正常卵巢組織、18例良性卵巢上皮性腫瘤組織和38例EOC組織組中Wnt1、Lgr5蛋白的表達(dá)情況，并分析兩因子與臨床病理特征間的關(guān)系及兩者的相關(guān)性。采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)

6、行數(shù)據(jù)統(tǒng)計以及相關(guān)性分析。計數(shù)資料采用Pearsonx2檢驗或Fisher確切概率法，兩等級變量間的相關(guān)性分析采用Spearman等級相關(guān)分析。所有檢驗均為雙側(cè)，以α=0.05作為檢驗水準(zhǔn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1、Wnt1蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞漿，Lgr5蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞漿和（或）胞膜，均呈棕黃色顆粒。在正常卵巢組織中，Wnt1和Lgr5蛋白主要表達(dá)于上皮細(xì)胞，陽性率均為11.1％。在良性卵巢上皮

7、性腫瘤組織中，Wnt1和Lgr5蛋白表達(dá)于腫瘤細(xì)胞，陽性率分別為33.3％、27.8％。EOC組織中，Wnt1和Lgr5蛋白表達(dá)于癌細(xì)胞，陽性率分別為81.6％、76.3％。三組間Wnt1和Lgr5蛋白的陽性率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）;二者在EOC組織中的陽性率均高于正常組織和良性腫瘤組織，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，但在正常組織和良性腫瘤組織中的陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　　2、EOC組織中

8、，Wnt1和Lgr5蛋白的表達(dá)與腫瘤組織學(xué)類型之間無明顯相關(guān)性，但與腫瘤的分化程度、手術(shù)病理分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況密切相關(guān)。Wnt1和Lgr5蛋白在漿液性囊腺癌、黏液性囊腺癌、子宮內(nèi)膜樣癌和透明細(xì)胞癌組織中的陽性率分別為90.9％/86.4％、75.0％/66.7％、50.0％、50.0％，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。在高中分化癌(G1、G2)中的陽性率分別為62.5％、50.0％，在低分化癌(G3)中的陽性率均為95.5％，差異

9、均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05），提示隨著腫瘤惡性程度的進(jìn)展，二者的表達(dá)水平也逐漸增高。在Ⅰ/Ⅱ期組中陽性率分別為53.8％、46.2％，在Ⅲ/Ⅳ期組中陽性率分別為96.0％、92.0％，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05）。在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的陽性率分別為95.7％、91.3％，在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的陽性率分別為60.0％、53.3％，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　3、經(jīng)相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，Wnt1和Lgr5蛋白在EOC組織

10、中的表達(dá)呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)rs=0.534，P=0.001，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05）。
　　結(jié)論:
　　1、Wnt1和Lgr5蛋白在卵巢上皮性癌組織中均為高表達(dá)，提示W(wǎng)nt信號通路可能參與了卵巢上皮性癌的發(fā)生。
　　2、Wnt1和Lgr5蛋白在卵巢上皮性癌組織中的表達(dá)與腫瘤分化程度、手術(shù)病理分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，提示W(wǎng)nt1和Lgr5在卵巢上皮性癌的發(fā)展、浸潤和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要作用。
　　3、卵巢上皮性