心鈉素對(duì)骨髓瘤細(xì)胞增殖及微小RNA-21表達(dá)的影響.pdf

1、目的:
　　1.觀察心鈉素(ANP)對(duì)骨髓瘤細(xì)胞株(MM1.S)增殖及細(xì)胞周期的影響。2.檢測(cè)微小RNA-21(miR-21)在MM1.S細(xì)胞中的表達(dá),探討ANP的抗腫瘤作用及其機(jī)制。
　　方法:
　　1.常規(guī)培養(yǎng)MM1.S細(xì)胞,取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
　　2.CCK-8法檢測(cè)不同濃度ANP作用MM1.S細(xì)胞24h、48h、72h后細(xì)胞增殖抑制情況。
　　3.流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同濃度ANP作用MM1.S

2、細(xì)胞24h的細(xì)胞周期。
　　4.Western blot法檢測(cè)MM1.S細(xì)胞ANP受體(NPR-A、NPR-C)的表達(dá)。
　　5.qRT-PCR檢測(cè)不同濃度ANP作用前及作用MM1.S細(xì)胞24h后miR-21的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　1. ANP對(duì)MM1.S細(xì)胞具有增殖抑制作用,在24h時(shí)抑制效果最強(qiáng),且在濃度(1.0-100umol/L)之間呈濃度依賴性((P<0.01)。
　　2.1.0umol/L

3、,10umol/L,50umol/L,100umol/L ANP處理 MM1.S細(xì)胞24h后,表現(xiàn)為G1期細(xì)胞比例較對(duì)照組明顯增加(P<0.01), S期、G2期細(xì)胞比例下降(P<0.05),提示ANP阻滯MM1.S細(xì)胞于G1期,并且隨著濃度增加(1.0-100umol/L),阻滯作用增強(qiáng),四個(gè)濃度組間兩兩比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異( P<0.05)。
　　3.MM1.S細(xì)胞存在ANP受體(NPR-A、NPR-C)的表達(dá)。
　　4.1

4、.0umol/L,10umol/L,50umol/L,100umol/L ANP作用MM1.S細(xì)胞24h后miR-21表達(dá)下調(diào),相對(duì)表達(dá)量較陰性對(duì)照組分別下降了8.6％、24.2%、37.5%和49%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　1.ANP可抑制MM1.S細(xì)胞增殖,并呈濃度依賴性,在作用24h時(shí)抑制效果最明顯。
　　結(jié)論:
　　2. ANP阻滯MM1.S細(xì)胞于G1期,從而抑制MM1.S細(xì)胞DNA合成。