瘦素mRNA及其蛋白質(zhì)在酒精性脂肪肝中的表達.pdf

1、為深入研究瘦素(1eptin)在酒精性脂肪肝中的表達，探索其在這種疾病中的發(fā)病作用，本研究通過生理方式喂食酒精建立大鼠酒精性脂肪肝模型，并采用分光光度法、ELISA法測定相關酶的活性及利用RT-PCR和免疫組化法檢測1eptinmRNA和蛋白在模型中的表達。結果表明：1.通過生理方式喂食酒精建立大鼠酒精性脂肪肝模型，由病理分析可知：酒精組大鼠肝小葉內(nèi)均出現(xiàn)大量的脂肪變性以及細胞水腫癥狀(中度以上)，且在匯管區(qū)域伴有少量炎細胞浸潤和部分點

2、狀壞死；酒精組肝系數(shù)高于對照組和正常組，說明酒精性脂肪肝模型已建立。 2.應用分光光度法測定血漿中與肝細胞損傷相關酶(AST、ALT)的活性及ELISA法測定血漿中TNF-a和1eptin含量，結果表明：酒精組血漿ALT、AST均高于對照組和正常組；同時酒精組TNF-a和leptin含量也高于對照組和正常組。 3.應用分光光度法測定10％的肝勻漿中的谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量

3、，結果表明：酒精組肝勻漿中GSH和SOD活性逐漸下降，MDA含量卻逐漸升高。 4.采用免疫組化法測定酒精組肝組織leptin蛋白分布及表達。免疫組化染色顯示：酒精組的枯否氏細胞(KC)呈陽性，主要以核內(nèi)表達為主，此外少量肝細胞以及匯管區(qū)內(nèi)肝纖維化細胞也呈陽性。 5.通過RT-PCR法檢測leptinmRNA在肝組織中的表達，結果顯示：酒精組leptinmRNA表達增強，且1eptin/B-actin比值也高于對照組和正常