湖北省煙草青枯病的病原學(xué)研究.pdf

1、煙草青枯病是由茄科雷爾氏菌（Ralstonia solanacearum）引起的典型的細(xì)菌性土傳病害，在我國煙草種植區(qū)普遍發(fā)生，其中以福建、廣西、貴州、云南、四川、湖南發(fā)生最為嚴(yán)重，造成極大的經(jīng)濟(jì)損失。近年來，隨著湖北煙草產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展，煙草青枯病的危害也日益加重，嚴(yán)重影響了該地區(qū)煙草的產(chǎn)量和品質(zhì)。本文從該病的病原學(xué)出發(fā)，在病原鑒定的基礎(chǔ)上，研究測定了煙草青枯病菌的生化型、生理小種、致病型、演化型及序列變種，并初步明確了該病在田間的發(fā)病

2、動(dòng)態(tài)，為湖北煙草青枯病防治和煙草抗青枯病品種的選育提供了理論基礎(chǔ)。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴2013年和2014年從湖北省恩施和十堰煙區(qū)采集煙草青枯病典型病株，在TTC選擇性培養(yǎng)基上分離純化獲得54個(gè)煙草青枯菌。采用細(xì)菌16S rRNA基因序列分析和青枯菌種的特異性引物PCR鑒定，將煙草青枯病的病原鑒定為R.solanacearum。⑵測試了54個(gè)菌株對碳水化合物（乳糖、麥芽糖、纖維二糖、甘露醇、山梨醇和甜醇）的氧化利用能力，將

3、所有供試菌株劃分為生化型Ⅲ;根據(jù)菌株對6種鑒別寄主（煙草、馬鈴薯、番茄、茄子、辣椒和花生）的抗感反應(yīng)，將供試菌株鑒定為生理小種1號。從54個(gè)菌株中選取23個(gè)菌株進(jìn)行了致病力測定，依據(jù)它們在3個(gè)煙草品種上的反應(yīng)進(jìn)行聚類分析，將其劃分了3個(gè)致病型:Ⅰ型菌株致病力較弱，平均病情指數(shù)為34.59，占供試菌株的21.74％;Ⅱ型菌株致病力中等，平均病情指數(shù)為59.02，占供試菌株的39.13％;Ⅲ型菌株致病力強(qiáng)，平均病情指數(shù)為81.33，占供試菌

4、株的39.13％。⑶通過演化型多重PCR(Pmx-PCR)對菌株的演化型進(jìn)行了鑒定，54個(gè)菌株均能擴(kuò)增得到片段大小分別為280 bp和144 bp的兩條特異性條帶，表明供試菌株均屬于演化型Ⅰ（亞洲分支）。基于青枯菌egl基因和mutS基因的部分序列，將54個(gè)菌株鑒定為演化型Ⅰ的3個(gè)序列變種，即序列變種15、17和44，其中序列變種17和44為優(yōu)勢序列變種，且均來源于恩施煙區(qū)，而序列變種15均來源于十堰煙區(qū)。⑷2013年和2014年對湖北