煙草青枯病抗性早期鑒定方法和遺傳基礎(chǔ)研究.pdf

1、煙草（Nicotianatabacum L.）是重要的經(jīng)濟(jì)作物，也是重要的模式植物。煙草青枯病是煙草生產(chǎn)中危害最大的病害之一。煙草青枯病屬土傳細(xì)菌性病害，由青枯雷爾氏菌引起，主要在我國(guó)南方各大煙區(qū)流行，但有向北發(fā)展的趨勢(shì)。利用抗病基因進(jìn)行遺傳改良，是防治煙草青枯病的有效途徑。本論文對(duì)煙草青枯病抗性的早期鑒定方法和遺傳基礎(chǔ)進(jìn)行了研究，以期為煙草青枯病抗性育種提供技術(shù)和理論基礎(chǔ)。主要結(jié)果如下：
　?。?）針對(duì)本試驗(yàn)室在煙草17號(hào)染色體

2、上已經(jīng)定位的1個(gè)青枯病抗性主效QTLqBWR17a。本研究選擇與其相距4cM之內(nèi)的6個(gè)SSR標(biāo)記，對(duì)23個(gè)煙草品種（系）進(jìn)行基因型分析，同時(shí)對(duì)這些品種（系）的青枯病抗性進(jìn)行田間鑒定。最終篩選出2個(gè)能在各個(gè)品種（系）中擴(kuò)增出清晰條帶的SSR標(biāo)記，其中PT51333在抗病品種（系）中的帶型均與抗病對(duì)照巖煙97一致，在感病品種（系）中的帶型均與感病對(duì)照 CB-1一致，而在中抗品種（系）中則呈現(xiàn)第三種帶型。運(yùn)用 T測(cè)驗(yàn)進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析發(fā)現(xiàn)，含有PT

3、51333抗性帶型的品種（系）與非抗性帶型的品種田間病情指數(shù)差異極顯著，該結(jié)果驗(yàn)證了該主效QTL在種質(zhì)資源中的可靠性。
　?。?）從田間青枯病抗性鑒定的煙草品種（系）中挑選出13份材料進(jìn)行苗期抗性鑒定。結(jié)果表明，采用沙培的方法，在5葉期時(shí)用106 cfu/ml菌液澆灌，能在25天內(nèi)分辨出不同青枯病抗性的煙草品種，與田間鑒定結(jié)果高度相關(guān)，說(shuō)明用此方法鑒定煙草苗期青枯病抗性是可靠的。
　?。?）以青枯病抗病品種D101和感病品種

4、長(zhǎng)脖黃（CBH）的幼苗為材料，用青枯菌懸浮液浸根，用高壓滅菌的青枯菌懸浮液做對(duì)照，設(shè)置3個(gè)生物學(xué)重復(fù)。處理3h后取根部提取RNA，進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序。在D101和CBH中分別檢測(cè)到73和519個(gè)差異表達(dá)基因，其中上調(diào)基因分別為55和304個(gè)，兩品種間相同27個(gè)；下調(diào)基因?yàn)?8和215個(gè)，兩品種間相同4個(gè)。CBH的差異表達(dá)基因數(shù)量明顯較多，這與其浸根3h時(shí)已表現(xiàn)明顯癥狀的事實(shí)相吻合。GO和KEGG分析表明，兩品種差異表達(dá)基因富集的GO條目和代