谷氨酰胺對(duì)大鼠肝臟缺血再灌注損傷的影響.pdf

1、目的：研究谷氨酰胺預(yù)處理對(duì)大鼠肝臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用并探討其機(jī)制。
　　 方法：雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠，體重250克-300克。將32只大鼠隨機(jī)分為生理鹽水對(duì)照組（Co組）和谷氨酰胺預(yù)處理組（Gln組），共4組（每組n=8），其中Gln組按照注射Gln劑量不同分為低劑量組（Gd組）：靜脈注射Gln0.15g·kg-1；中劑量組（Gz組）：靜脈注射Gln0.45g·kg-1和高劑量組（Gg）組：靜脈注射

2、Gln0.75g·kg-1。預(yù)處理4小時(shí)后Kume法阻斷肝十二指腸韌帶致肝臟缺血1小時(shí)，然后松開血管夾恢復(fù)灌注，關(guān)腹?；謴?fù)灌注2小時(shí)后，經(jīng)心臟采血5ml，離心后取上層血清置于-30℃冰箱保存，待檢測(cè)血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）。開腹取肝組織，一部分用4％中性多聚甲醛溶液及時(shí)固定，待做石蠟切片，比較各組肝組織HE染色切片，光鏡下觀察肝組織的變化；一部分置于-70℃冰箱保存待做勻漿。比色法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度、丙二醛（MDA）的含量、Na

3、+-K+ATP酶以及超氧化物歧化酶（SOD）的活性。
　　 結(jié)果：
　　 1Co組在缺血1小時(shí)再灌注2小時(shí)后肝臟顏色變成暗紅色，質(zhì)地變軟，可見片狀壞死區(qū)和無復(fù)流區(qū)；Gln各組在缺血1小時(shí)再灌注2小時(shí)后肝臟色澤均勻，未見壞死灶。
　　 2在缺血1小時(shí)再灌注2小時(shí)后，Co組光鏡下肝血竇和中央靜脈有不同程度的淤血，肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂，肝細(xì)胞水腫明顯伴較多空泡變性，中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)明顯，并有散在的肝細(xì)胞片狀壞死灶；Gln組肝組

4、織結(jié)構(gòu)相似，但較Co組相比，肝細(xì)胞損傷較輕，偶見單個(gè)壞死細(xì)胞。
　　 3Co組、Gd組、Gz組和Gg組的血清ALT水平分別為1160.00±180.89U/L、1024.38±127.04U/L、727.63±142.72U/L和486.50±108.24U/L，Gz組和Gg組ALT水平低于Co組（P<0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Gd組ALT水平低于Co組但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　 4Co組、Gd組、Gz組和G

5、g組的SOD活力分別為203.67±71.03NU/mgprot、277.37±43.90NU/mgprot、352.01±69.65NU/mgprot和439.02±59.40NU/mgprot，Gln各組SOD活力均高于Co組（P<0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。且隨著谷氨酰胺劑量的增加，SOD活力逐漸增高（P<0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 5Co組、Gd組、Gz組和Gg組的MDA含量分別為54.58±9.50nmol/ml、

6、46.28±5.50nmol/ml、37.75±5.10nmol/ml和32.51±6.54nmol/ml，Gln各組MDA含量均低于Co組（P<0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Gz組和Gg組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），但隨著谷氨酰胺劑量的增加，MDA含量有下降趨勢(shì)。
　　 6Co組、Gd組、Gz組和Gg組的Na+-K+ATP酶活性分別為0.73±0.15umolpi/mgprol/hour、1.17±0.69umolpi/mg

7、prol/Hour、1.54±0.20umolpi/mgprol/hour和2.18±0.35umolpi/mgp-rol/hour，Gln各組Na+-K+ATP酶活性均高于Co組（P<0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且隨著谷氨酰胺劑量的增加，Na+-K+ATP酶活性逐漸增高（P<0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 7Co組、Gd組、Gz組和Gg組的Ca2+濃度分別為254.00±23.32nmol/ml、194.63±13.62nmo

8、l/ml、154.88±12.61nmol/ml和108.89±11.72nmol/ml，Gln各組Ca2+濃度均低于Co組（P<0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且隨著谷氨酰胺（Gln）劑量的增加，Ca2+濃度逐漸降低（P<0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：
　　 1補(bǔ)充外源性谷氨酰胺能對(duì)肝臟缺血再灌注損傷起到保護(hù)作用。
　　 2Na+-K+ATP酶活性是影響鈣超載的因素之一，谷氨酰胺在對(duì)抗鈣超載引起的肝臟缺血再