清開靈眼用凝膠對實驗性自身免疫性葡萄膜炎大鼠Th1、Th2細胞的影響的實驗研究.pdf

1、提要目的：目的：利用光感受器間維生素A類結(jié)合蛋白(interphoteceptretinoidbindingproteinIRBP)的致葡萄膜視網(wǎng)膜炎活性建立實驗性自身免疫性葡萄膜炎（ExperimentalAutoimmuneUveitisEAU）模型，應(yīng)用清開靈眼用凝膠對其干預(yù)，探討清開靈眼用凝膠治療實驗性自身免疫性葡萄膜炎大鼠的可行性及對其Th1、Th2細胞的影響方法：方法：1、觀察清開靈眼用凝膠對EAU大鼠的作用并與地塞米松點眼

2、組進行比較，觀察其療效，為其進一步應(yīng)用于臨床葡萄膜炎的防治奠定基礎(chǔ)。將健康無眼病的清潔級雌性Lewis大鼠隨機分為三組，每組36只均將200μl含有100μgIRBP11771191及完全弗氏佐劑的混合液，充分乳化后在Lewis大鼠雙側(cè)后足墊皮下、尾根部及軀干皮下均勻注射6點進行免疫建立動物模型。A組為模型對照組，免疫后均無藥物點眼，B組為清開靈眼用凝膠點眼組，免疫后第1天起予清開靈眼用凝膠點眼，3次日，C組為地塞米松點眼組，免疫后第1

3、天起予0.1%地塞米松點眼，3次日。免疫后第1天，3天，5天，7天，9天，11天，13天，15天，17天對動物模型應(yīng)用裂隙燈觀察眼前節(jié)炎癥反應(yīng)，記錄發(fā)病程度，進行炎癥分級并于第9天處死大鼠36只組，行眼部病理檢查，進行病理分級。2、清開靈眼用凝膠對實驗性自身免疫性葡萄膜炎大鼠Th1、Th2細胞的影響于免疫后第9天過量麻醉處死大鼠，制備T細胞的單細胞懸液。應(yīng)用流式細胞儀分析各組CD4CD8IFNγ的百分比及計算CD4CD8的比值。應(yīng)用電泳

4、儀分析各組0，3579天外周血中IFNγ，IL4細胞因子的表達強弱。應(yīng)用實時熒光定量PCR分析各組0，3579天淋巴結(jié)中IFNγ，IL4細胞因子的表達強弱。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附測定法（Elisa）測定各組大鼠脾臟和淋巴結(jié)細胞培養(yǎng)上清及房水中IFNγ，IL4的濃度。結(jié)果：結(jié)果：1.清開靈眼用凝膠對EAU大鼠的療效觀察。（1）從大鼠眼部炎癥表現(xiàn)所見，清開靈眼用凝膠和地塞米松注射液均抑制EAU大鼠的發(fā)病，并且兩者之間差別不大。各組大鼠眼部的炎癥得

5、分分別為：模型對照組：(3.600.52)分。清開靈組：(1.20.63)分。地塞米松組：（1.00.67）分。（2）病理檢查（HE染色）所見，模型對照組大鼠眼球外層視網(wǎng)膜廣泛而重度的AnexperimentalresearchontheinfluenceofQingKaiLingOphthalmicGeltoTh1Th2cellsinratswithexperimentalautoimmuneuveitisSpeciality:Oph

6、thalmologyCombinationofTCMWesternMedicineAuth:WeiHhaSuTut:Prof.BiHongshengABSTRACTObjective:ExpletheimpactoftheQingKaiLingOphthalmicGelonTh1Th2cellsintheratswithexperimentalautoimmuneuveitis(EAU)providethetheeticalbasisf

7、clinicalwidelyusingMethods:1.ToobservetheeffectofQingKaiLingOphthalmicGelontheratswithexperimentalautoimmuneuveitis(EAU)compareditseffectwiththedexamethasoneinjectionthroughtheintraperitonealinjectionappraisingiteffectfi

8、tsfurtherappliedtoclinicaluveitislaythefoundationfthepreventioncontrol.EAUwasinducedinLewisratsbyimmunizationwithIRBP1177–1191incompleteFreund’sadjuvant.Theratswereromlydividedintothreegroups.GroupA(modelcontrol)groupB(Q

9、ingKaiLingOphthalmicGelpointingeye)groupC(dexamethasoneinjectionthroughtheintraperitonealinjection)evaluatedclinicallyondays07911131517evaluatedinflammationpathologicallyondays9.2.DiscusstheimpactoftheQingKaiLingOphthalm

10、icGelonTh1Th2cellsintheratswithexperimentalautoimmuneuveitis(EAU)EAUwasinducedinLewisratsbyimmunizationwithIRBP1177–1191incompleteFreund’sadjuvant.Theratswereromlydividedintothreegroups.GroupA(modelcontrol)groupB(QingKai

11、LingOphthalmicGelpointingeye)groupC(dexamethasoneinjectionthroughtheintraperitonealinjection).Executedratsondays9lymphocytesfromlymphnodes(LNs)spleenweresubjectedculturedthatstimulatedbyIRBP1177–1191toflowcytometrytoanal