脫鈣異體骨關節(jié)移植修復兔關節(jié)軟骨缺損的關節(jié)滑液蛋白質組學研究.pdf

1、目的：如何妥善修復各種原因導致的關節(jié)軟骨損傷多年來一直是各國研究人員致力解決的重要問題。越來越多的證據表明，生長因子在關節(jié)軟骨生理生長的各個過程如增殖、成熟、基質代謝等均扮演著重要的角色，以信號調節(jié)的方式對關節(jié)軟骨損傷的修復起著復雜的促進作用。脫鈣異體骨關節(jié)對關節(jié)軟骨損傷修復的誘導作用已被大量實驗證實。本研究將脫鈣骨關節(jié)移植至新西蘭大白兔膝關節(jié)缺損處，通過體液蛋白質組學的分法分析移植后關節(jié)滑液中各種蛋白與不移植組的差別，以期尋找移植后在

2、關節(jié)軟骨再生過程中機體產生的特異性蛋白，并據此來探討關節(jié)軟骨再生過程中相關蛋白的作用機制和模型。
　　 方法：先行制備保護關節(jié)軟骨的脫鈣異體骨關節(jié)，然后再選取20只新西蘭大白兔，均在左側膝關節(jié)股骨髕骨溝中心處造成直徑4mm、深度3mm的關節(jié)軟骨缺損，并隨機分成2組，Ⅰ組為實驗組，在關節(jié)軟骨缺損處移植入脫鈣骨關節(jié)，Ⅱ組為空白對照組，曠置關節(jié)軟骨缺損。此后定期在移植術當天、移植術后第8周、第12周、第16周、第24周分別抽取各組關節(jié)

3、液并進行二維凝膠電泳，以及MADLI-TOF-TOF-MS分析和相關數據庫查證鑒定，與空白對照組進行對比分析。
　　 結果：成功建立新西蘭大白兔關節(jié)軟骨缺損模型，并利用制備好的脫鈣骨關節(jié)誘導機體修復軟骨缺損，通過二維凝膠電泳對兔膝關節(jié)滑液中所產生的各種蛋白質進行分離，發(fā)現(xiàn)實驗組與對照組相比出現(xiàn)了顯著的差異蛋白點。按照實驗原理應有的變化趨勢，在上述差異蛋白質點中篩選出23個有意義的差異點，在進一步的質譜分析中，根據各個差異點的分子

4、量和肽段序列，在數據庫中進行搜索和查詢，確定在實驗組中出現(xiàn)了GI值分別為187735841、163796533、736808的與關節(jié)軟骨再生可能相關的三種蛋白。
　　 結論：在關節(jié)軟骨再生的過程中關節(jié)滑液產生了特異性的蛋白質，此三種蛋白質及其所屬族群的作用分別為：GI值為187735841的Tape measure蛋白與維持細胞功能密切相關，參與基因表達的過程啟動；GI值為163796533的DNA/RNA解旋酶屬于SNF2家族