脫鈣異體骨關(guān)節(jié)移植修復(fù)兔關(guān)節(jié)軟骨缺損的關(guān)節(jié)滑液蛋白質(zhì)組學研究.pdf

1、目的：如何妥善修復(fù)各種原因?qū)е碌年P(guān)節(jié)軟骨損傷多年來一直是各國研究人員致力解決的重要問題。越來越多的證據(jù)表明，生長因子在關(guān)節(jié)軟骨生理生長的各個過程如增殖、成熟、基質(zhì)代謝等均扮演著重要的角色，以信號調(diào)節(jié)的方式對關(guān)節(jié)軟骨損傷的修復(fù)起著復(fù)雜的促進作用。脫鈣異體骨關(guān)節(jié)對關(guān)節(jié)軟骨損傷修復(fù)的誘導作用已被大量實驗證實。本研究將脫鈣骨關(guān)節(jié)移植至新西蘭大白兔膝關(guān)節(jié)缺損處，通過體液蛋白質(zhì)組學的分法分析移植后關(guān)節(jié)滑液中各種蛋白與不移植組的差別，以期尋找移植后在

2、關(guān)節(jié)軟骨再生過程中機體產(chǎn)生的特異性蛋白，并據(jù)此來探討關(guān)節(jié)軟骨再生過程中相關(guān)蛋白的作用機制和模型。
　　 方法：先行制備保護關(guān)節(jié)軟骨的脫鈣異體骨關(guān)節(jié)，然后再選取20只新西蘭大白兔，均在左側(cè)膝關(guān)節(jié)股骨髕骨溝中心處造成直徑4mm、深度3mm的關(guān)節(jié)軟骨缺損，并隨機分成2組，Ⅰ組為實驗組，在關(guān)節(jié)軟骨缺損處移植入脫鈣骨關(guān)節(jié)，Ⅱ組為空白對照組，曠置關(guān)節(jié)軟骨缺損。此后定期在移植術(shù)當天、移植術(shù)后第8周、第12周、第16周、第24周分別抽取各組關(guān)節(jié)

3、液并進行二維凝膠電泳，以及MADLI-TOF-TOF-MS分析和相關(guān)數(shù)據(jù)庫查證鑒定，與空白對照組進行對比分析。
　　 結(jié)果：成功建立新西蘭大白兔關(guān)節(jié)軟骨缺損模型，并利用制備好的脫鈣骨關(guān)節(jié)誘導機體修復(fù)軟骨缺損，通過二維凝膠電泳對兔膝關(guān)節(jié)滑液中所產(chǎn)生的各種蛋白質(zhì)進行分離，發(fā)現(xiàn)實驗組與對照組相比出現(xiàn)了顯著的差異蛋白點。按照實驗原理應(yīng)有的變化趨勢，在上述差異蛋白質(zhì)點中篩選出23個有意義的差異點，在進一步的質(zhì)譜分析中，根據(jù)各個差異點的分子

4、量和肽段序列，在數(shù)據(jù)庫中進行搜索和查詢，確定在實驗組中出現(xiàn)了GI值分別為187735841、163796533、736808的與關(guān)節(jié)軟骨再生可能相關(guān)的三種蛋白。
　　 結(jié)論：在關(guān)節(jié)軟骨再生的過程中關(guān)節(jié)滑液產(chǎn)生了特異性的蛋白質(zhì)，此三種蛋白質(zhì)及其所屬族群的作用分別為：GI值為187735841的Tape measure蛋白與維持細胞功能密切相關(guān)，參與基因表達的過程啟動；GI值為163796533的DNA/RNA解旋酶屬于SNF2家族