豬瘟病毒基因芯片診斷技術(shù)的研究及應(yīng)用.pdf

1、本研究采用以基因測序?yàn)榛A(chǔ)的系統(tǒng)進(jìn)化樹分析方法，對(duì)黑龍江省部分地區(qū)豬瘟病毒流行株進(jìn)行分離鑒定和E2基因序列分析，并與傳統(tǒng)的石門強(qiáng)毒和豬瘟兔化弱毒在抗原基因上存在的變異進(jìn)行比較。研究結(jié)果表明：病料為CSFV感染，CSF流行毒株和疫苗株在核苷酸和氨基酸序列上存在一定的差異，E2基因部分序列接近Alfort，與Brescia同源性最低。該試驗(yàn)從核酸和蛋白質(zhì)水平上研究了黑龍江省部分地區(qū)豬瘟病毒流行株與其它標(biāo)準(zhǔn)毒株之間的同源性及其變異情況，揭示了

2、在該省豬瘟流行的本質(zhì)，為實(shí)施科學(xué)有效的豬瘟防制措施提供依據(jù)?！　”狙芯客ㄟ^RT-PCR擴(kuò)增CSAV相當(dāng)保守的NS基因作靶DNA制作芯片，將被檢樣品在PCR過程中用Cy-5標(biāo)記，得到DNA產(chǎn)物與芯片雜交，達(dá)到檢測CSFV的目的，建立CSF基因芯片診斷方法；同時(shí)通過研究不同靶探針濃度對(duì)檢測結(jié)果的影響，確立最佳反應(yīng)條件靶探針濃度為1μg/μl；分析芯片診斷技術(shù)的特異性和敏感性等技術(shù)指標(biāo)；與RT-PCR方法和間接熒光抗體試驗(yàn)方法進(jìn)行比較，并開

3、展了初步應(yīng)用。本研究建立的CSFV基因芯片診斷技術(shù)，可以成功地檢測到CSFV保守區(qū)基因，熒光信號(hào)清晰，敏感性和特異性高，實(shí)際應(yīng)用效果好，是一種檢出率高的診斷方法?！　】傊狙芯繉⒒蛐酒夹g(shù)應(yīng)用于動(dòng)物疫病的診斷，成功建立了CSFV基因芯片診斷技術(shù)平臺(tái)，解決了CSF診斷中的難題，具有重大的理論意義和應(yīng)用價(jià)值。為今后利用基因芯片開展動(dòng)物疫病診斷和研究提供理論依據(jù)，也為控制和消滅CSF奠定基礎(chǔ)。但要實(shí)現(xiàn)基因芯片在動(dòng)物疫病方面的廣泛應(yīng)用，還