PPAR-γ配體pioglitazone對膽管癌細胞體外侵襲力的影響及相關基因表達的調控.pdf

1、目的：肝門部膽管癌因位置特殊、起病隱匿，故早期診斷不易，手術切除率較低，預后不容樂觀。選擇MMP-7及其抑制物TIMP-1作為膽管癌的侵襲相關基因從而在基因水平研究膽管癌的浸潤和轉移機制是必要的。本實驗旨在明確肝門膽管癌細胞系QBC939細胞中是否存在MMP-7和TIMP-1表達，為我們今后的實驗打下理論基礎。 方法：通過逆轉錄聚合酶鏈反應(Reverse transcription-polymerase chainreacti

2、on，RT-PCR)，檢測體外培養(yǎng)的肝門膽管癌細胞系QBC939細胞中兩個目的基因MMP-7、TIMP-1 mRNA水平的表達。 結果：MMP-7 mRNA、TIMP-1 mRNA在QBC939細胞中均有表達，且前者的表達水平高于后者。 結論：通過RT-PCR對QBC939細胞的檢測，證實了MMP-7和TIMP-1基因在mRNA水平皆有表達。 第二部分 PPAR—γ經(jīng)其配體Piog litazone激活后

3、對人肝門部膽管癌細胞系GBC939 mP-7、TIMP-1mRNA表達的影響目的：探討過氧化物酶體增殖物激活受體-γ(PPAR-γ)經(jīng)其配體吡格列酮(Pioglitazone，PGZ)激活后對肝門部膽管癌細胞系QBC939細胞的增殖和MMP-7、TIMP-1表達的影響。 方法：通過四氮唑藍比色法(MTT)檢測不同濃度、不同時間點PGZ對QBC939細胞的抑制率；通過熒光定量PCR(FQ-PCR)檢測不同濃度的PGZ干預12小時對

4、QBC939細胞MMP-7、TIMP-1 mRNA表達的影響。 結果：在24、48、72小時干預點，PGZ明顯抑制了QBC939細胞的生長，各實驗組與對照組比較，有顯著性差異(P<0.001)；而12小時、PGZ濃度40μmol/l以下時，無明顯的細胞毒性作用(P>0.05)。PGZ能下調QBC939細胞MMP-7 mRNA的表達(P<0.001)，并有劑量依賴效應；TIMP-1有上調趨勢，但未顯示出統(tǒng)計學意義(P=0.125)

5、。 結論：PPAR-γ經(jīng)其配體PGZ激活后對QBC939細胞的增殖有抑制作用;PGZ能下調MMP-7 mRNA表達，并有劑量依賴效應。 目的：探討過氧化物酶體增殖物激活受體-γ(PPAR-γ)經(jīng)其配體Pioglitazone(PGZ)激活后對人肝門部膽管癌細胞系QBC939細胞的體外侵襲力的影響。 方法：通過Matrigel侵襲實驗測定QBC939細胞經(jīng)PPAR-γ配體PGZ作用后穿透人工基底膜的情況；通過過河實