桑葉中芳香化酶抑制劑的快速發(fā)現(xiàn)及黃酮類化合物與P450酶作用選擇性研究.pdf

1、芳香化酶(CYP19)是生物體催化雄性激素轉(zhuǎn)變?yōu)榇菩约に氐南匏倜?其抑制劑在絕經(jīng)后雌激素受體陽性乳腺癌患者的治療中具有重要地位。從天然產(chǎn)物中發(fā)現(xiàn)選擇性高、副作用小的芳香化酶抑制劑或藥物前體是進(jìn)行乳腺癌藥物開發(fā)的重要方向。本文以桑葉為研究對象,利用HPLC-MS/MS技術(shù),建立了一種快速發(fā)現(xiàn)芳香化酶抑制劑的分析方法。同時進(jìn)一步探討了黃酮類化合物與芳香化酶、CYP1A1等P450酶作用的選擇性。主要研究內(nèi)容如下:
　　1.利用HPLC

2、-MS/MS技術(shù),推測鑒定了桑葉提取物中的十五個化合物,并對其ESI質(zhì)譜裂解途徑進(jìn)行了分析。這些化合物分別為:3,5,7,3’,4’-pentahydroxyflavone 3-glucosylglucoside/3,5,7,3’,4’-pentahydroxyflavone3,7-di-glucoside; moracin-M 6,3’-diglucoside(mulberroside F);3,5,7,3’,4’-pentahydr

3、oxy-flavone3-(6"-malonyl)-glucoside;3,5,7,4’-tetrahydroxyflavone3-(6"-malonyl)-glucoside;3,5,7,4’-tetrahydroxyflavone 3-(6"-acetyl)-glucoside;3,5,7,3’,4’-penta-hydroxyflavone 3-rutinoside(rutin);3,5,7,3’,4’-pentahydroxyf

4、lavone 3-glucoside/3,5,7,2’,4’-pentahydroxyflavone 3-glucoside; kuwanon G;5,7,3’,4’-tetrahydroxy-flavone 7-rutinoside/3,5,7,4’-tetrahydroxyflavone 3-rutinoside;3,5,7,4’-tetrahydro-xyflavone 3-glucoside(astragalin);3,5,7,

5、3’,4’-pentahydroxyflavone 3-(6"-acetyl)-glucoside;化合物12;13; chalcomoracin/mongolicin F;9,12,15-octadecatrienoic acid(linolenic acid)。
　　2.建立了一種從桑葉提取物中快速篩選出具有芳香化酶結(jié)合能力的化合物的分析方法,并對其結(jié)合能力進(jìn)行了定量評價。同時采用生化模型對篩選結(jié)果進(jìn)行驗證。基于第一部分的鑒定

6、研究,確定篩選出的化合物為:3,5,7,3’,4’-pentahydroxyflavone 3-rutinoside(rutin);3,5,7,3’,4’-pentahydroxyflavone 3-glucoside/3,5,7,2’,4’-pentahydroxyflavone3-glucoside;3,5,7,4’-tetrahydroxyfla-vone 3-glucoside (astragalin);化合物12;13; ch

7、alcomoracin/mongolicin F;9,12,15-octadecatrienoic acid(linolenic acid)。
　　3.選取了二十一個不同結(jié)構(gòu)的黃酮化合物,分別對其芳香化酶結(jié)合能力、芳香化酶抑制能力和CYP1A1結(jié)合能力進(jìn)行了測定。分析了芳香化酶及CYP1A1與黃酮類化合物結(jié)合的選擇性。芳香化酶對黃酮類化合物的結(jié)合有很強(qiáng)的結(jié)構(gòu)選擇性。優(yōu)先結(jié)合黃酮和異戊烯黃酮;對異黃酮和二氫黃酮的選擇性受取代基影響較