茶黃素對兔骨髓基質干細胞向脂肪細胞誘導分化的影響.pdf

1、目的：茶黃素是紅茶中的主要成分，具有調節(jié)血脂、抗氧化、抗腫瘤、抗心腦血管疾病等多種藥理活性。以往茶黃素對人體內脂肪代謝的影響多數(shù)屬于宏觀分析，實驗在細胞水平上探討茶黃素對兔骨髓基質干細胞向脂肪細胞分化的影響。 方法：實驗于2007-05/09在安徽醫(yī)科大學附屬省立醫(yī)院中心實驗室完成。①動物：清潔級4～8周齡家兔10只，由安徽醫(yī)科大學動物試驗中心提供，實驗過程中對動物的處置符合動物倫理學標準。②實驗方法：兔全身肝素化后麻醉狀態(tài)下處

2、死，取雙側股骨脛骨和肱骨，去除軟組織，切除包括骺板在內的兩側骺端，采用全骨髓法分離培養(yǎng)骨髓基質干細胞，按2×108L-1密度接種，當細胞生長至80％～90％融合時消化傳代。取傳至3代的細胞按l×105/cm2密度接種，加入含重組人胰島素1 0mg/L、地塞米松10-6mol/L，0.5mmol/LIBMX的DMEM成脂誘導液培養(yǎng)2周。設立3組：脂肪對照組單純放入成脂誘導液1ml；茶黃素組向多少1ml成脂誘導液中加入500μg/L茶黃素；

3、空白對照組僅加入等量普通DMEM培養(yǎng)液。③實驗評估：取第2代培養(yǎng)細胞繪制生長曲線；油紅O染色對誘導的脂肪細胞進行鑒定，計算脂肪細胞轉化率。 　　結果：①細胞生長曲線：骨髓基質干細胞具有旺盛的增殖能力，培養(yǎng)1d為細胞適應期，3d后為對數(shù)增長期，8d時進入平臺期，之后細胞增殖迅速減慢，細胞數(shù)下降。②脂肪細胞油紅O染色鑒定結果：脂肪細胞中的脂滴被染成橙紅色，胞核為藍色。脂肪對照組多數(shù)骨髓基質干細胞誘導為脂肪細胞，轉化率為(64.8 4.8)