膜分離技術(shù)精制地龍活性組分群及其藥理活性的研究.pdf

1、現(xiàn)代膜分離技術(shù)利用膜孔徑大小特征將物質(zhì)進(jìn)行分離，能有效地分離提純同一活性組分群，其產(chǎn)物或是單一成分，或是同一分子量區(qū)段的多種成分。膜分離技術(shù)具有節(jié)能、高效、無(wú)相變化、操作方便、無(wú)二次污染、操作溫度低等特點(diǎn)，在中藥尤其是主要活性成分為熱敏性蛋白的動(dòng)物藥的分離純化中有廣泛的應(yīng)用前景.動(dòng)物藥地龍成分多元化，現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，具有抗凝、溶栓、抑制血小板聚集、抗心律失常、抗癌、鎮(zhèn)痛、解熱、平喘等作用。其活性成分主要是各種蛋白酶系，目前研究得最多的

2、是地龍的幾種溶栓酶系，從地龍中提取活性酶成分常用步驟是：制備地龍勻漿液→鹽析→凝膠層析→離子交換層析→HPLC或FPLC純化，雖然具有一定的可行性，但步驟繁雜，實(shí)驗(yàn)要求高，不適合大規(guī)模生產(chǎn)。
　　 本課題根據(jù)動(dòng)物類中藥地龍的主要有效成分為蛋白多肽類物質(zhì)，且其分子量分布與藥效作用有密切相關(guān)性的基本原理，以膜分離技術(shù)運(yùn)用于地龍有效組分的分離提純，對(duì)膜材料、膜孔徑進(jìn)行篩選，研究膜過(guò)程各項(xiàng)參數(shù)的影響，制訂膜分離制備地龍系列組分的操作工藝

3、，精制出多個(gè)具有不同分子量分布特征的地龍活性組分群，測(cè)定它們的蛋白含量、分子量分布、溶栓活性、超氧歧化酶活性、抑瘤活性，為大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)提供理論基礎(chǔ)和數(shù)據(jù)支持。
　　 結(jié)果表明：
　　 (1)使用高分子有機(jī)合成膜聚偏氟乙烯分離時(shí)，最佳操作條件為0.25MPa，50℃，200r/min，pH=6.7，地龍濃度為33.3％(W:W)，NaCl的加入量為0；無(wú)機(jī)陶瓷膜管分離地龍勻漿液時(shí)，一級(jí)膜管用0.2μmAl2O3膜管、二

4、級(jí)膜管用50nmZrO2膜管，最佳操作條件為：0.15MPa，50℃，33.3％pH=6.7，不加NaCl。
　　 (2)通過(guò)藥理活性檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，地龍勻漿液進(jìn)行膜分離時(shí)，有機(jī)膜PVDF有良好的分離純化效果，而無(wú)機(jī)膜一級(jí)膜分離效果較差，且有效成分損失大，不適合于蛋白質(zhì)的分離純化，但二級(jí)膜分離效果較好，提示可將蛋白濃度大的動(dòng)物藥勻漿液先預(yù)處理后再用小孔徑的無(wú)機(jī)膜進(jìn)行分離提純。
　　 (3)地龍中的纖溶活性成分、超氧歧化酶活性成