鞘氨醇激酶保護(hù)心肌缺血-再灌注損傷和治療缺血性心臟病的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、1-磷酸鞘氨醇(Sphingosinel-phosphate，S1P)是由鞘氨醇激酶(sphingosine kinase1，SPK1)催化產(chǎn)生的一種主要的鞘磷脂代謝產(chǎn)物。研究結(jié)果表明，S1P可以保護(hù)低氧導(dǎo)致的心肌細(xì)胞損傷。此外，SPK1最近被證明是介導(dǎo)心肌缺血預(yù)適應(yīng)產(chǎn)生的一個(gè)關(guān)鍵分子。但是，SPK1是否可以保護(hù)缺血缺氧導(dǎo)致的心肌損傷以及腺病毒介導(dǎo)的SPKl基因轉(zhuǎn)染是否可以作為治療缺血性心臟病的一種新的手段，目前還不清楚，本課題對(duì)此進(jìn)行

2、了系統(tǒng)研究。我們首次觀察SPK1/S1P對(duì)活性氧自由基H<,2>O<,2>誘導(dǎo)心肌細(xì)胞死亡的保護(hù)作用；其次利用離體心臟缺血再灌注模型，研究高表達(dá)SPK1基因的心臟對(duì)缺血再灌注的抵抗能力；最后利用結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支造成的心肌缺血模型，探索腺病毒介導(dǎo)的SPK1局部轉(zhuǎn)染對(duì)缺血性心臟病的治療作用。 取得的主要結(jié)果如下： H<,2>O<,2>可以劑量依賴性的導(dǎo)致心肌細(xì)胞的死亡；H<,2>O<,2>能明顯抑制心肌細(xì)胞SPK1激酶活

3、性和Edg-3受體的表達(dá)，但促進(jìn)Edg-1受體表達(dá)；心臟多位點(diǎn)注射Ad-SPK1后3天的心臟心肌組織SPK1激酶活性明顯升高，比對(duì)照組升高大約5倍左右；注射Ad-SPK1的心臟對(duì)缺血再灌注損傷有明顯的抵抗能力，表現(xiàn)在心臟的收縮和舒張功能在缺血和再灌注過程中沒有明顯受到損傷、在再灌注過程中CK釋放明顯減少、心律失常發(fā)生的頻率和持續(xù)時(shí)間明顯低于GFP對(duì)照組；Ad-SPK1局部注射對(duì)冠狀動(dòng)脈左前降支導(dǎo)致的心肌缺血有明顯的治療作用，表現(xiàn)在心臟的

4、收縮和舒張功能得到了明顯改善，左心室收縮壓(left ventricular systolicpressure，LNSP)：Ad-SPK1 132.82±13.03對(duì)Ad-GFP 76.96±8.44 mmHg，p<0.01；左心室末期舒張壓(left ventricular end-diastolic pressure，LVEDP)：Ad-SPK14.34±0.69對(duì)Ad-GFP 14.79±1.08 mmHg，p<0.01；最大dP

5、/dt：Ad-SPK1 5095.20±384.79對(duì)Ad-GFP 2954.12±195.05，p<0.01；左心室重構(gòu)也得到了明顯改善，表現(xiàn)在缺血區(qū)面積：Ad-SPK1 3.78±0.96對(duì)Ad-GFP 38.86±5.68(％)，p<0.01；左心室直徑：Ad-SPK14.63±0.80對(duì)Ad-GFP 7.30±1.03mm，p<0.01；左心室壁厚度：Ad-SPK1 2.70±0.29對(duì)Ad-GFP 1.34±0.36mm，p<