中國(guó)人群IgA腎病相關(guān)基因MEGSIN的單核苷酸多態(tài)性的檢測(cè)和單倍型圖譜的構(gòu)建.pdf

1、全球范圍內(nèi)，IgA腎病(IgANephropathy,IgAN)是最為常見的原發(fā)性腎小球疾病，也是導(dǎo)致終末期腎病(End-StageRenalFailure，ESRD)最主要的病因之一，約10～20％患者在確診后10～20年內(nèi)不可避免的進(jìn)行性發(fā)展到ESRD。到目前為止，IgA腎病的病因和發(fā)病機(jī)理尚未完全清楚，國(guó)內(nèi)外大量的研究進(jìn)展表明本病與遺傳因素、環(huán)境因素相關(guān)，屬多基因疾病。 MEGSIN基因是在腎小球系膜細(xì)胞優(yōu)勢(shì)表達(dá)的基因，是

2、絲氨酸蛋白酶抑制劑超家族的一個(gè)新成員。本課題組在前期的研究中采用傳遞不平衡檢驗(yàn)(transmissiondisequilibriumtest，TDT)和單倍體相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)(haplotyperelativerisk，HRR)分析法對(duì)MEGSIN基因3'端非翻譯區(qū)的C2093T和C2180T區(qū)的基因多態(tài)性進(jìn)行分析研究后發(fā)現(xiàn)，2093C和2180T與IgA腎病相關(guān)，同時(shí)大樣本的病例-對(duì)照研究也支持上述結(jié)果，因此推測(cè)MEGSIN基因是IgA腎病的

3、相關(guān)基因。 為了進(jìn)一步闡明本基因的多態(tài)性及構(gòu)建單倍型域和單倍型，本研究選取208例彼此無(wú)血緣關(guān)系的中國(guó)漢族個(gè)體，提取基因組DNA，對(duì)包含外顯子、外顯子—內(nèi)含子交界區(qū)及5'UTR區(qū)、3'UTR區(qū)的PCR產(chǎn)物進(jìn)行直接測(cè)序，綜合正反向測(cè)序結(jié)果識(shí)別和鑒定基因內(nèi)SNPs(singlenucleotidepolymorphisms)。所得結(jié)果在美國(guó)國(guó)立生物技術(shù)信息中心(NCBI)的SNP數(shù)據(jù)庫(kù)(dbSNP)中進(jìn)行查詢和比較；基因頻率大于5％

4、的16個(gè)SNPs利用Haploview軟件包進(jìn)行連鎖不平衡分析(linkagedisequilibrium，LD)、單倍型域(Haplotypeblock)和單倍型(Haplotype)的構(gòu)建。 本研究在所有研究對(duì)象中共發(fā)現(xiàn)24個(gè)SNPs，22個(gè)位于非編碼區(qū)，2個(gè)位于編碼區(qū)；其中22個(gè)為替換型SNP，1個(gè)為插入型SNP，另一個(gè)為缺失型SNP；其中有6個(gè)SNPs在數(shù)據(jù)庫(kù)中未報(bào)道；數(shù)據(jù)庫(kù)己報(bào)道的4個(gè)SNPs，本次研究未能在中國(guó)人群中

5、證實(shí)。連鎖不平衡的分析結(jié)果表明整個(gè)基因被劃分為兩個(gè)單倍型域，前兩個(gè)SNPs組成一個(gè)小的單倍型域；chr18：59610346至chr18：59623523問(wèn)14個(gè)SNPs存在強(qiáng)連鎖不平衡，它們位于一個(gè)大的單倍型域中。進(jìn)一步分析兩個(gè)單倍型域內(nèi)所有單倍型，發(fā)現(xiàn)每個(gè)單倍型域內(nèi)的常見單倍型只有有限的幾種，與國(guó)際上有關(guān)單倍型域的研究結(jié)果一致。 本研究首次對(duì)中國(guó)漢族人群MEGSIN基因進(jìn)行單核苷酸多態(tài)性、單倍型域以及單倍型的分析。本次研究表