活性氧導致腸上皮細胞線粒體結(jié)構(gòu)與功能損傷的初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究首先在體外模擬活性氧損傷腸上皮細胞的作用,即采用H<,2>O<,2>(一種活性氧的代表)建立損傷細胞模型,觀察不同濃度的H<,2>O<,2>對細胞(SW 480)線粒體結(jié)構(gòu)和功能的影響、膜電位改變與細胞凋亡的關系以及相關基因(如bcl-2)的表達情況.其次,我們采用4mM H<,2>O<,2>處理細胞后進行線粒體DNA的提取,對細胞色素c氧化酶(COX Ⅰ、COXⅡ、COXⅢ)、ATP合成酶(ATP6 亞基、ATP8亞基)基因進行

2、PCR擴增,并將PCR產(chǎn)物進行直接測序;同時于該時相點進行上述兩個酶活性的測定.鑒于H<,2>O<,2>可導致腸上皮細胞的凋亡,并導致mtDNA編碼細胞色素c氧化酶基因產(chǎn)生突變,造成該酶活性的下降.為此,我們采用生物信息學技術(shù),運用計算機同源模建的方法先后模擬了人天然細胞色素c氧化酶亞單位COXⅠ和其突變體、天然細胞色素c氧化酶亞單位COXⅡ及其突變體、天然細胞色素c氧化酶亞單位COXⅢ的空間結(jié)構(gòu),并利用已有的實驗數(shù)據(jù),結(jié)合模建的結(jié)果進

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