抗豬輪狀病毒VP6單克隆抗體的制備與鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究用純化的重組PRVVP6蛋白作為免疫原，免疫8周齡BALB/c雌性小鼠，運用淋巴細胞雜交瘤技術，通過間接ELISA篩選，采用有限稀釋法，經過4次克隆篩選，獲得了一株穩(wěn)定分泌抗PRVVP6的單克隆抗體的雜交瘤細胞株，命名C5D10。經鑒定C5D10為IgG1亞類，雜交瘤細胞的平均染色體數為93，細胞培養(yǎng)液上清及腹水效價分別為1：800和1：1×106，且C5D10單克隆抗體不與豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒、豬偽狂犬病病毒發(fā)生

2、交叉反應，顯示良好的特異性。 用抗PRVVP6蛋白單克隆抗體和PRV多克隆抗血清對感染PRV的Marc-145細胞培養(yǎng)物進行了間接免疫熒光檢測病原的比較研究：McAb所進行的間接免疫熒光染色后，PRV感染細胞培養(yǎng)物中多數細胞在其胞漿和細胞膜上出現綠色閃亮熒光，且熒光強度強，未接種病毒的細胞培養(yǎng)物未見有綠色閃亮熒光染色的細胞存在；利用PRV全病毒制備的抗血清對接種病毒和未接種病毒的細胞培養(yǎng)物進行間接免疫熒光試驗表明，接種病毒的細胞

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