抗痘苗病毒基因工程抗體的研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩64頁未讀， 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、　　首先，我們進(jìn)行了抗VACVFab噬菌體抗體庫的構(gòu)建。我們先采集具有高滴度VACV抗體的免疫鼠脾，分離淋巴細(xì)胞，然后進(jìn)行總RNA的提取以及cDNA的合成，接著用一系列特異性的PCR引物通過PCR擴(kuò)增特異性輕鏈基因和重鏈Fd段基因，在對PCR產(chǎn)物鑒定和純化后，用輕鏈混合物與噬菌粒pComb3構(gòu)建輕鏈庫，隨后隨機(jī)挑選克隆進(jìn)行輕鏈插入率鑒定，在確保輕鏈庫的質(zhì)量后，將重鏈混合物克隆入輕鏈庫中構(gòu)建Fab噬菌體抗體庫，同樣隨機(jī)挑選克隆進(jìn)行重鏈插入

2、率鑒定。最后使用輔助噬菌體對Fab噬菌體抗體庫進(jìn)行包裝，檢測庫容量，結(jié)果表明我們所構(gòu)建的Fab噬菌體抗體庫的容量為2×107，輕鏈插入率和重鏈插入率分別為100％和90％，足以滿足我們篩庫的需要。　　在成功構(gòu)建Fab噬菌體抗體庫的基礎(chǔ)上，我們用純化的VACV病毒對Fab噬菌體抗體庫進(jìn)行富集，目的是擴(kuò)大篩選范圍，有效地篩選出特異性抗VACVFab抗體。隨機(jī)挑選50個3次富集篩選后的單菌落對其進(jìn)行了誘導(dǎo)表達(dá)，并通過ELISA進(jìn)行篩選，共獲

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論