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文檔簡介
1、 輪狀病毒(RV)是引起全世界嬰幼兒和幼齡動物嚴重腹瀉的最重要、最常見的病原。在發(fā)展中國家,每年因RV感染發(fā)生中度和嚴重腹瀉以及死亡的兒童高達1887萬人;在發(fā)達國家,因RV感染造成的經濟損失是一個不容忽視的問題。據估計美國每年就此一項的醫(yī)藥損失高達2億6千萬美元。鑒于RV危害嚴重且無有效的治療手段,世界衛(wèi)生組織(WHO)將RV疫苗列為最優(yōu)先發(fā)展的疫苗項目之一。目前正在研制的候選RV疫苗包括重組或減毒疫苗、滅活疫苗、病毒樣顆粒(VLP
2、s)疫苗、亞單位疫苗、DNA疫苗和轉基因植物疫苗等,動物實驗表明這些疫苗的免疫保護效果差異較大,因此對于新型RV疫苗的研究仍在探索之中?! 組RV血清型眾多,疫苗研究實踐表明,包含中和性抗原的多價疫苗的效果要好于單價疫苗。為了探索以非復制型腺病毒為表達載體的多價RV基因工程疫苗的可行性,我們在前期獲得了表達我國A組RVG1型、G2型和G3型流行毒株VP7基因的非復制型重組腺病毒rvAdG1VP7、rvAdG2VP7和rvAdG3VP
3、7,并對其免疫效果進行了研究,均獲得了良好的免疫效果。RVVP6蛋白是其主要的組特異性抗原,有較強的抗原性和免疫原性,可誘導保護性免疫。研究表明,VP6蛋白的IgA單克隆抗體對RV感染具有免疫保護作用,肌注免疫VP6DNA疫苗可產生較好的異源保護作用,以VP6蛋白和黏膜佐劑免疫小鼠可誘導產生對鼠RVEDIM株的完全保護作用。為了獲得更有效的RV基因工程疫苗,我們在前期構建了表達我國A組RVVP6基因的非復制型重組腺病毒rvAdVP6。
4、 本論文在上述工作的基礎上,對輪狀病毒重組腺病毒疫苗rvAdVP6的免疫效果進行了研究。以Balb/c小鼠為實驗動物模型,對表達我國A組RVVP6基因的非復制型重組腺病毒rvAdVP6的免疫效果進行了研究,結果表明rvAdVP6與rvAdG1VP7、rvAdG2VP7和rvAdG3VP7一樣,也獲得了較好的免疫效果;在此工作基礎上,對RVVP6基因的優(yōu)化改造策略方法進行了研究,結果表明通過改良的套式PCR策略,應用逐步拼接法成功地合成
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