奶牛飼用酶制劑篩選及應用的研究.pdf

1、本文旨在對奶牛用酶篩選的關鍵因素進行探討，初步建立篩選方法，并通過體內(nèi)外相結合的試驗技術對初選酶制劑效果進行驗證。試驗一，選擇5種纖維素酶產(chǎn)品(C1、C2、C3、C4、C5)和5種木聚糖酶產(chǎn)品(X1、X2、X3、X4、X5)分別在不同pH(4.0、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0)、不同溫度(37℃、39℃和50℃)、不同底物和瘤胃離子強度條件下測定纖維素酶和木聚糖酶活性表現(xiàn)；試驗二，在瘤胃條件(39℃、pH6.0和瘤胃離子強度)

2、下，測定10種酶對苜蓿、羊草、玉米秸稈和玉米青貯4種粗飼料為底物還原糖的產(chǎn)生量，根據(jù)酶在最適條件和瘤胃條件酶活性損失情況和分解底物產(chǎn)生還原糖的量的多少初步篩選出適合奶牛日糧應用酶產(chǎn)品，并探討酶活性種類(纖維素酶與木聚糖酶)與還原糖產(chǎn)生量的相關性；試驗三，采用正交試驗設計對初選的幾種酶制劑進行配伍，篩選出針對不同粗飼料最適酶制劑組合并研究酶添加水平對底物DM降解率的影響；試驗四，應用人工瘤胃產(chǎn)氣法研究所篩選的酶制劑組合對4種粗飼料體外產(chǎn)氣

3、量、DM和NDF降解率的影響；試驗五，通過飼養(yǎng)試驗研究酶制劑組合對奶牛產(chǎn)奶量、乳成分的影響，對酶制劑效果進行驗證。結果表明: 1.溫度、pH、測定底物和離子強度對纖維素酶和木聚糖酶活性均有不同程度的影響，其中溫度和pH是影響纖維素酶和木聚糖酶活性的關鍵因素，瘤胃離子強度對多數(shù)纖維素酶和木聚糖酶有抑制作用但是影響較小，篩選纖維素酶和木聚糖酶與測定底物的選擇無關。 2.酶分解苜蓿、玉米秸稈和玉米青貯產(chǎn)生還原糖的量與纖維素酶活

4、性成正相關(R2為0.8848、0.9135和0.7343，P<0.01)，分解羊草產(chǎn)生還原糖的量與木聚糖酶活性成正相關(R2=0.6408，P<0.01)，選擇C1、C3、X1和X4為初步篩選的酶制劑產(chǎn)品。 3.在本試驗條件下，苜蓿、玉米秸稈和羊草最適的酶制劑組合和比例是C1∶C3∶X1∶X4=1∶3∶3∶3，對玉米青貯最適的酶制劑組合和比例是C1∶C3∶X1:X4=3∶3∶2∶l。 4.發(fā)酵后4h到試驗結束，試驗組在

5、各時間點的產(chǎn)氣量均高于對照組但差異不顯著(P>0.05)，在產(chǎn)氣初期加酶效果不明顯。發(fā)酵后6h 4種粗飼料DM和NDF降解率差異不顯著(P<0.05)，在12h和24h加酶顯著的提高羊草DM降解率(P<0.05)，對其他3種粗飼料DM降解率影響較小但試驗組在數(shù)值上略高于對照組:發(fā)酵后12h加酶顯著提高苜蓿、羊草、玉米青貯NDF降解率(P<0.05)，但對玉米秸稈NDF降解率影響不顯著只是數(shù)值上試驗組高于對照組；在發(fā)酵后24h加酶顯著的提