奶牛飼用酶制劑篩選及應(yīng)用的研究.pdf

1、本文旨在對(duì)奶牛用酶篩選的關(guān)鍵因素進(jìn)行探討，初步建立篩選方法，并通過(guò)體內(nèi)外相結(jié)合的試驗(yàn)技術(shù)對(duì)初選酶制劑效果進(jìn)行驗(yàn)證。試驗(yàn)一，選擇5種纖維素酶產(chǎn)品(C1、C2、C3、C4、C5)和5種木聚糖酶產(chǎn)品(X1、X2、X3、X4、X5)分別在不同pH(4.0、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0)、不同溫度(37℃、39℃和50℃)、不同底物和瘤胃離子強(qiáng)度條件下測(cè)定纖維素酶和木聚糖酶活性表現(xiàn)；試驗(yàn)二，在瘤胃條件(39℃、pH6.0和瘤胃離子強(qiáng)度)

2、下，測(cè)定10種酶對(duì)苜蓿、羊草、玉米秸稈和玉米青貯4種粗飼料為底物還原糖的產(chǎn)生量，根據(jù)酶在最適條件和瘤胃條件酶活性損失情況和分解底物產(chǎn)生還原糖的量的多少初步篩選出適合奶牛日糧應(yīng)用酶產(chǎn)品，并探討酶活性種類(lèi)(纖維素酶與木聚糖酶)與還原糖產(chǎn)生量的相關(guān)性；試驗(yàn)三，采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)初選的幾種酶制劑進(jìn)行配伍，篩選出針對(duì)不同粗飼料最適酶制劑組合并研究酶添加水平對(duì)底物DM降解率的影響；試驗(yàn)四，應(yīng)用人工瘤胃產(chǎn)氣法研究所篩選的酶制劑組合對(duì)4種粗飼料體外產(chǎn)氣

3、量、DM和NDF降解率的影響；試驗(yàn)五，通過(guò)飼養(yǎng)試驗(yàn)研究酶制劑組合對(duì)奶牛產(chǎn)奶量、乳成分的影響，對(duì)酶制劑效果進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果表明: 1.溫度、pH、測(cè)定底物和離子強(qiáng)度對(duì)纖維素酶和木聚糖酶活性均有不同程度的影響，其中溫度和pH是影響纖維素酶和木聚糖酶活性的關(guān)鍵因素，瘤胃離子強(qiáng)度對(duì)多數(shù)纖維素酶和木聚糖酶有抑制作用但是影響較小，篩選纖維素酶和木聚糖酶與測(cè)定底物的選擇無(wú)關(guān)。 2.酶分解苜蓿、玉米秸稈和玉米青貯產(chǎn)生還原糖的量與纖維素酶活

4、性成正相關(guān)(R2為0.8848、0.9135和0.7343，P<0.01)，分解羊草產(chǎn)生還原糖的量與木聚糖酶活性成正相關(guān)(R2=0.6408，P<0.01)，選擇C1、C3、X1和X4為初步篩選的酶制劑產(chǎn)品。 3.在本試驗(yàn)條件下，苜蓿、玉米秸稈和羊草最適的酶制劑組合和比例是C1∶C3∶X1∶X4=1∶3∶3∶3，對(duì)玉米青貯最適的酶制劑組合和比例是C1∶C3∶X1:X4=3∶3∶2∶l。 4.發(fā)酵后4h到試驗(yàn)結(jié)束，試驗(yàn)組在

5、各時(shí)間點(diǎn)的產(chǎn)氣量均高于對(duì)照組但差異不顯著(P>0.05)，在產(chǎn)氣初期加酶效果不明顯。發(fā)酵后6h 4種粗飼料DM和NDF降解率差異不顯著(P<0.05)，在12h和24h加酶顯著的提高羊草DM降解率(P<0.05)，對(duì)其他3種粗飼料DM降解率影響較小但試驗(yàn)組在數(shù)值上略高于對(duì)照組:發(fā)酵后12h加酶顯著提高苜蓿、羊草、玉米青貯NDF降解率(P<0.05)，但對(duì)玉米秸稈NDF降解率影響不顯著只是數(shù)值上試驗(yàn)組高于對(duì)照組；在發(fā)酵后24h加酶顯著的提