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1、中圖分類號UDC碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼!Q三蘭密級壘玨miR1和miR184對SHSY5Y細(xì)胞系多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(DAT)表達(dá)的調(diào)節(jié)作用TheregulationofmiR一1andmiR184ontheexpressionofDATgeneinSHSY5Ycell作者姓學(xué)科專研究方學(xué)院(系、指導(dǎo)教名:薛亮業(yè):臨床醫(yī)學(xué)向:臨床心理學(xué)所):湘雅二醫(yī)院師:朱熊兆教授論文答辯日期絲!絲£!蘭星答辯委員會主席中南大學(xué)二0一四年五月miR1和miR18
2、4對SHSY5Y細(xì)胞系多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(DAT)表達(dá)的調(diào)節(jié)作用摘要目的:檢測miR1、miR184及多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(dopaminetransporter,DAT)在多巴胺能細(xì)胞系SHSY5Y中的表達(dá),探討miR1、miR184在SHSY5Y細(xì)胞系中對DAT基因表達(dá)的影響及其作用機(jī)制。方法:采用microRNAorg、miRBase、TargetScan等在線數(shù)據(jù)庫預(yù)測和文獻(xiàn)參閱相結(jié)合的方法,選擇可能作用于DAT基因的候選miRNAs,并化學(xué)
3、合成候選miRNAs模擬物(miRNAsmimics和inhibitor)轉(zhuǎn)染到SHSY5Y細(xì)胞中。分別于轉(zhuǎn)染后12h和24h后,提取NCmimics組、NCinhibitor組、miRNAsmimics組和miRNAsinhibitor組細(xì)胞總RNA和蛋白;采用實(shí)時熒光定量RTPCR檢測各組細(xì)胞內(nèi)的候選miRNA、DATmRNA表達(dá)水平;采用WesternBlot檢測各組細(xì)胞內(nèi)DAT蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:(1)通過生物信息學(xué)預(yù)測結(jié)合參考
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