14072.斜紋夜蛾蛻皮激素受體(ecrusp)與熱激蛋白分子70(hsphsc70)相互作用研究

1、華南師范大學(xué)碩士學(xué)位論文斜紋夜蛾蛻皮激素受體(EcR／USP)與熱激蛋白分子70(Hsp／HscTO)相互作用研究學(xué)位申請(qǐng)人：指導(dǎo)教師：專業(yè)：院系：論文提交日期：龔艷君黃立華副教授生物化學(xué)與分子生物學(xué)生命科學(xué)學(xué)院2013一0531摘要斜紋夜蛾蛻皮激素受體(Ec剛USP)與熱激蛋白分子70(Hsp／Hsc70)相互作用研究專業(yè)名稱：生物化學(xué)與分子生物學(xué)申請(qǐng)人：龔艷君導(dǎo)師姓名：黃立華摘要蛻皮激素受體二聚體(Ec舢SP)在昆蟲變態(tài)發(fā)育過(guò)程中起

2、著至關(guān)重要的調(diào)控作用。研究表明EcR／USP只有與熱激蛋白(Heatshockprotein，Hsp)分予伴侶作用以后才能獲得DNA結(jié)合能力，參與其它基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控。為了明確EcR／USP與HSP／HSC70問(wèn)的蛋白相互作用，我們以一種重要蔬菜害蟲——斜紋夜蛾為研究對(duì)象，利用COIP和LC／MS的方法發(fā)現(xiàn)HSP／HSC70與Ec蝴cRBl之間存在蛋白相互作用。為進(jìn)一步明確兩兩間的蛋白互作關(guān)系，。我們利用原核細(xì)胞分別表達(dá)了EcRA、EcR

3、Bl、USPl、USP2的融合蛋白，采用Pulldown、Westernblot、Farwestem等方法發(fā)現(xiàn)HSP70和HSC70能夠分別與EcRA、EcRB1、USPl和USP2產(chǎn)生蛋白質(zhì)相互作用。為進(jìn)一步探究這種蛋白質(zhì)互作對(duì)Ec舢SP功能的影響，我們采用細(xì)胞轉(zhuǎn)染和免疫組化的方法，應(yīng)用激光共聚焦顯微鏡研究了這些蛋白質(zhì)在『F常情況以及在20E誘導(dǎo)情況下的亞細(xì)胞定位情況。結(jié)果表明，正常情況下，Hsp70主要定位于細(xì)胞質(zhì)中，而EcRBl、