2118.果蠅來源crac通道蛋白的表達(dá)與純化

1、分類號：QZ!密級t公玨l刃If單位代碼：!Q3學(xué)號t2Ql生15QQ鰱卸耗先誓碩士學(xué)位論文⑩英文論文題目：一ExpressionandpurificationofDrosophilaCRAC￡h曼堅邑呈!乜￡Ql￡i望￡論文作者：奎玉區(qū)指導(dǎo)教師：塞造教授專業(yè)名稱；生盔坐研究方向：金i生盎堂所在學(xué)院：生金拄堂堂睦論文提交日期：2Q12生Q目l目論文答辯日期：2017生06自06日果蠅來源CRAC通道蛋白的表達(dá)與純化專業(yè)：生態(tài)學(xué)研究生：李

2、玉風(fēng)指導(dǎo)教師：宗浩教授摘要：Ca2是真核細(xì)胞重要的細(xì)胞內(nèi)信使。細(xì)胞內(nèi)Ca2濃度的變化是許多生理進(jìn)程所必需的。鈣庫操縱的鈣通道(SOCs)是鈣離子流入細(xì)胞內(nèi)的主要的方式，其中最著名最具特色的是鈣離子釋放激活鈣離子(CRAC)通道。CRAC通道調(diào)節(jié)許多基本的細(xì)胞功能，包括基因表達(dá)、細(xì)胞增殖、細(xì)胞分泌等。在近十幾年里，作為CRAC通道的Orai蛋白和作為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子感受器的STIM蛋白的發(fā)現(xiàn)是理解CRAC通道的機(jī)制和功能取得極大進(jìn)步的基礎(chǔ)。當(dāng)

3、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣庫釋放后，STIM蛋白發(fā)生一系列的構(gòu)象變化與Orai蛋白相互作用，從而開放CRAC通道，允許細(xì)胞外的鈣離子流入細(xì)胞內(nèi)。但CRAC通道門控的分子機(jī)制仍然知之甚少。為了進(jìn)一步揭示CRAC通道門控的分子機(jī)制，我們表達(dá)并分離純化了果蠅源的Oral蛋白和STIM蛋白不同片段。在過程中對STIM蛋白不同片段的分離純化條件進(jìn)行了優(yōu)化，對STIM蛋白不同片段進(jìn)行了功能測試，并最終獲得了較穩(wěn)定并具有功能的STIM蛋白片段，同時對純化的Orai蛋白