果蠅中waw基因的敲除及其蛋白的純化.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、果蠅是一種模式生物，有著豐富的遺傳學表型，在基因功能的研究中常被使用。waw基因是E.coli中LepA在果蠅中的同源基因。 LepA是翻譯延伸因子，在核糖體翻譯蛋白質過程的延伸步驟中與核糖體作用，引起核糖體“反轉運”，從而使得翻譯過程中不正確配對的氨基酸退回，糾正錯配。 為了研究果蠅中waw基因的功能，我們構建了一個含有突變ATG，并且有移碼突變片段的外源質粒pTARG-Δwaw。 通過質粒大提的方法獲得用于注

2、射要求的質粒，與helper gene一起提純，顯微注射的方法注射到果蠅的卵中，利用同源重組的原理，在果蠅中進行基因打靶，敲除目的基因，又使用了P因子跳出的方法敲除了目的基因。 同時，利用UAS-GAL4系統構建了一個用于過表達和一個帶GFP用于定位的質粒pUAST-waw，pUAST-waw-GFP，同樣使用顯微注射的方法將提純的質粒與helper gene一起注射的果蠅的卵中。 為了研究該基因在體外的功能，我們利用H

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