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文檔簡介
1、西北大學碩士學位論文AEC柱前衍生化寡糖鏈的HPLC分離及LCESIMS分析姓名:郭文申請學位級別:碩士專業(yè):中藥學指導(dǎo)教師:黃琳娟20100613HPLCandLCESIMSanalysisofoligosaccharideschainbypre—columnderivatizationwith3amino一9一ethylcarbazoleAbstractInthispaperweused3amino一9一ethylcarbazole
2、(AEC)asaderivatizingreagentforderivatizationanalysischitooligosaccharidesandNglycanchainofglycoproteinsbasedonanalysisAEC—labeledmonosaccharidesThederivativeswereseparatedbyreversephaseHPLCandidentifiedbyLCESIMSFinallywe
3、haveobtainedtheseresultsasfollows:1InthispaperweuseAECforderivatizationanalysischitooligosaccharidesThederivativeswereseparatedbyreverse—phaseHPLCandidentifiedbyESIMSandonlineLCESIMSWeoptimizedtheHPLCconditionsofLCESI—MS
4、analysis,ThecolumnusedWasfilledwithRPC18packing(5#m,250minx46mm)ThemobilephaseWascomprisedof10mmol/Lammomumacetate,pH45(solventA),andacetonitrile(solventB),theAEC—labeledchitooligosaccharideswereelutedusingagradientprogr
5、amasfollowing:from90%Ato75%Afor80minataflowrateof02mL/minTheAEC1abeledchitooligosaccharidesWasdetectedbyUVat254nnqToachieveasimultaneousseparationandstructureidentifiedthedifferentdegreeofpolymerizationofoligosaccharides
6、2WefurtherexpandtheapplicationofAEC,useitasaderivatizingreagentforderivatizationanalysisNglycanchainofribonucleaseBandhenovalbuminEstablishedthemethodforderivatizationanalysisNglycanchainsseparatedbyreverse—phaseHPLCandi
7、dentifiedbyESI—MSandonlineLCESIMSAtfirst,weusePNGaseFenzymeteleasedNglycanchainofglycoproteinandisolationandpurificationitCompletethisstep,weuseAECasaderivatizingreagentforderivatizationanalysisNglycanchainofribonuclease
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