乙酰氨基糖和唾液酸的柱前衍生HPLC-FLD(UV)-MS分析.pdf

1、隨著對糖生物學(xué)活性和生理功能研究的不斷深入，糖類研究成為近年來的一個(gè)研究熱點(diǎn)。高效液相色譜（HPLC）及其聯(lián)用技術(shù)由于具有快速、靈敏、準(zhǔn)確、高效、自動化程度高等特點(diǎn)，已經(jīng)成為糖類物質(zhì)分析的重要方法之一。雖然糖類的HPLC分析方法已經(jīng)有大量報(bào)導(dǎo)，但是這些方法大多數(shù)是針對普通單糖進(jìn)行分析檢測。糖類衍生物（如N-乙酰葡萄糖胺、唾液酸等）具有多樣性的結(jié)構(gòu)和獨(dú)特的生物學(xué)活性，它們大多數(shù)與人體內(nèi)某些生理活動和功能相關(guān)聯(lián)，因此受到了越來越多的關(guān)注。然

2、而，對糖類衍生物的高靈敏分析檢測方法鮮見報(bào)道。目前糖類衍生物的分析檢測主要存在兩大難題：分離困難和檢測靈敏度低。為了解決兩大難題，本論文采用高靈敏衍生試劑（熒光或紫外）柱前衍生化處理使糖分子變成帶有發(fā)色基團(tuán)的物質(zhì)，改變其分子結(jié)構(gòu)，從而有利于色譜分離及紫外或熒光的高靈敏檢測，提高分離程度及檢測靈敏度。該課題重點(diǎn)研究了幾種糖衍生物的提取方法和檢測方法，建立了多種生物樣品中糖衍生物的檢測方法。主要研究內(nèi)容如下：
　　第一章：簡述糖類分析

3、的現(xiàn)狀。介紹糖類的生物活性及分析難點(diǎn)，高效液相色譜技術(shù)在糖類研究中的應(yīng)用，糖類衍生化分析發(fā)展概況。
　　第二章：利用1-(2-萘基)-3-甲基-5-吡唑啉酮（NMP）作為柱前衍生試劑，建立高效、靈敏檢測多種乙酰氨基糖（N-乙酰葡萄糖胺、N-乙酰半乳糖胺、N-乙酰神經(jīng)氨酸、N-羥乙酰神經(jīng)氨酸）的高效液相色譜分離檢測方法，通過對樣品水解條件的優(yōu)化，該方法成功應(yīng)用于蕨麻樣品和奶制品樣品中乙酰氨基糖含量的測定。
　　第三章：建立了一

4、種新型血清唾液酸的熒光檢測方法。采用2-[2-(7H-二苯并[a，g]咔唑-乙氧基)-乙基肼基甲酸酯（DBCEEC）對唾液酸進(jìn)行標(biāo)記，建立高效、靈敏的高效液相色譜—質(zhì)譜（HPLC-MS）方法，并成功用于人體血液中唾液酸的檢測。通過質(zhì)譜鑒定結(jié)構(gòu)解釋了該類衍生反應(yīng)的原理，對衍生條件和唾液酸水解條件通過響應(yīng)面進(jìn)行優(yōu)化，對比了正常體內(nèi)血清和癌癥病人血清中唾液酸的含量變化。
　　第四章：合成金屬—有機(jī)骨架材料（UiO-66-NH2）作為吸附