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文檔簡介
1、庫爾勒香梨是新疆名優(yōu)特產(chǎn)瓜果,因其獨特的風味受到國內(nèi)外消費者的親睞.但近年來其外形色澤發(fā)生變化、口感降低、品質退化,嚴重威脅這一名優(yōu)水果的生產(chǎn)和發(fā)展.據(jù)報道這種情況的發(fā)生與病毒病的發(fā)生存在一定關系,而病毒感染庫爾勒香梨后不產(chǎn)生明顯的癥狀,對早期診斷和預防造成了極大的困難.血清學方法靈敏、快速己廣泛用于大批量的病毒檢測.從庫爾勒香梨分離獲得2個病毒分離物,經(jīng)鑒定為蘋果褪綠葉斑病毒(Apple chloroti cleaf spot vir
2、us,ACLSV)和蘋果莖溝病毒(Apple stem groo ving virus,ASGV).該論文在抗血清制備中,改變傳統(tǒng)的抗原提取方法,采用基因工程的方法獲得抗原,根據(jù)已報道的ACLSV不同分離物P863、P205和A-BaII的核苷酸序列設計引物,通過PCR擴增、克隆和測序,得到ACLSV庫爾勒香梨分離物外殼蛋白基因全長cDNA,長849bp,分析所得序列,含有一個開放閱讀框架(open readi ng frame,ORF
3、),ORF起始于56-58nt的起始密碼子AUG,終止于635-637nt的終止密碼子UAA,長582bp,推測編碼一個由193個氨基酸組成,分子量約22kDa的蛋白質.與已報道的P863、P205和A-BaII的外殼蛋白基因序列分析比較,結果表明,核苷酸序列同源性分別為81.2%、86.1%和80.0%,氨基酸序列同源性分別為88.0%、89.6%和84.9%.再根據(jù)序列分析結果構建ACLSV外殼蛋白基因原核表達載體,通過原核表達及提
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