多形白僵菌（Beauveria amorpha）代謝物中單胺氧化酶抑制劑的研究.pdf

1、在一次對供試菌株抑制單胺氧化酶活性物質(zhì)的篩選過程中,發(fā)現(xiàn)一株多形白僵菌菌株Ba02[Beauveria amorpha(Hohn.)von Arx]發(fā)酵液的代謝產(chǎn)物具有很強的抑制單胺氧化酶活性.該試驗就是建立在此基礎(chǔ)上展開了進(jìn)一步的研究.主要內(nèi)容包括:發(fā)酵液乙酸乙酯萃取脂溶相樣品半數(shù)抑制濃度(IC<,50>)及其動力學(xué)特征的研究;最佳發(fā)酵時間的確定;活性組分的分離提取工藝和純化技術(shù)路線;甲醇提取物的體內(nèi)活性研究;單一化合物的結(jié)構(gòu)鑒定.濃

2、度和抑制單胺氧化酶(MAO)活性關(guān)系研究表明:在一定濃度范圍內(nèi)Ba02菌株發(fā)酵液脂溶相組分對MAO的抑制活性呈量效關(guān)系,經(jīng)計算得出其對MAO-A、MAO-B抑制的IC<,50>分別為18.3μg.ml<'-1>、28.2μg.ml<'-1>;抑制特征曲線表明Ba02菌株發(fā)酵液脂溶相組分對MAO-A呈競爭型抑制,對MAO-B為混合型抑制,Km值分別為0.47×10-5mol.L<'-1>、0.11×10<'-5>mol.L<'-1>.應(yīng)用

3、薄層層析試驗得出:Ba02菌株的最佳發(fā)酵時間為10.5d.通過對最佳濃縮溫度、萃取試劑、萃取體積比、萃取次數(shù)的篩選試驗,確定了最佳提取工藝:50℃濃縮發(fā)酵液至原體積的1/5,3倍體積95％乙醇(乙醇終濃度為70％)醇沉,棄沉淀并脫醇后,以乙酸乙酯為萃取試劑,2∶1的體積比進(jìn)行萃取,分三次萃取,取脂溶相,脫去乙酸乙酯有機溶劑后冷凍干燥.該試驗采用硅膠吸附層析色譜對粗提物進(jìn)行初步純化,通過薄層層析進(jìn)行最佳流動相篩選,結(jié)果表明:Ba02菌株脂