28879.植酸酶基因分離及其與木霉系統(tǒng)發(fā)育的關系

1、山東理工大學山東理工大學碩士學位論文植酸酶基因分離及其與木霉系統(tǒng)發(fā)育的關系植酸酶基因分離及其與木霉系統(tǒng)發(fā)育的關系PhytasePhytasePhytasePhytaseGGGGeneeneeneeneIsolationIsolationIsolationIsolationItsItsItsItsRelationshipRelationshipRelationshipRelationshipwithwithwithwithTrichode

2、rmaTrichodermaTrichodermaTrichodermaPhylogenPhylogenPhylogenPhylogenyyyy研究生：羅俊彩羅俊彩羅俊彩羅俊彩指導教師：楊合同楊合同楊合同楊合同協(xié)助指導教師：扈進冬扈進冬扈進冬扈進冬申請學位門類級別：理理理理學學學學碩碩碩碩士士士士學科專業(yè)名稱：生物化學與分子生物學生物化學與分子生物學生物化學與分子生物學生物化學與分子生物學研究方向：微生物分子生物學微生物分子生物學微生物

3、分子生物學微生物分子生物學論文完成日期：2010201020102010年年年年4444月月月月29292929日日日日分類號：Q939.95Q939.95Q939.95Q939.95密級：單位代碼：10433104331043310433學號：Y0710166Y0710166Y0710166Y0710166山東理工大學碩士學位論文摘要I摘要木霉是一類常見的生防真菌，具有重要的科研價值和廣闊的應用前景。對木霉進行準確的分類鑒定具有重要的

4、意義。本研究主要做了以下工作：1.對148個木霉菌株在平板上進行了植酸酶酶活測定，發(fā)現(xiàn)所有菌株都產生了水解圈，這些菌株包括實驗室保存的14株、從中國農業(yè)微生物菌種保藏中心購買的5株、從山東5地區(qū)土壤樣品中分離的87株和從新疆地區(qū)土樣中分離的42株共16個種類，涵蓋了我國已發(fā)現(xiàn)木霉的主要種類，說明產植酸酶是木霉菌的普遍屬性。2.選取48個不同的菌株進行了木霉植酸酶基因序列PCR擴增，結果從其中的15個菌株中獲得了植酸酶基因序列片段，其中不

5、同菌株的四個植酸酶基因片段已經在GenBank注冊（注冊號為：GQ325590，F(xiàn)J501953，F(xiàn)J515694，F(xiàn)J515695）。這15個序列片段具有不同程度的差異，具有多樣性的特點，另外33個菌株沒有分離到植酸酶基因，這也說明該基因具有一定的多樣性。3對側耳木霉（Trichodermapleuroticola）T21植酸酶完整編碼基因進行分析。側耳木霉T21植酸酶基因序列全長1720bp，包含1443bp的植酸酶編碼基因的完整序

6、列和三段內含子序列，編碼480個氨基酸，5’端有一段編碼23個氨基酸的信號肽序列，其余的457個氨基酸殘基為成熟植酸酶的氨基酸序列。4對分離的15個植酸酶基因序列及對應菌株的ITS序列，利用分子生物學分析軟件DNAMAN采用最大似然法構建進化樹，并且分別得出這15個菌株的這2段不同序列的距離矩陣。比較這2個距離矩陣和系統(tǒng)發(fā)育樹發(fā)現(xiàn)，對于親緣關系較遠的遠緣種，比如屬于不同組的木霉，用ITS序列進行鑒定可以得到更好的結果。對于一些親緣關系較