29789.蛋白質(zhì)寡核苷酸適配體的篩選與應(yīng)用研究

1、山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文蛋白質(zhì)寡核苷酸適配體的篩選與應(yīng)用研究姓名：張?jiān)聜b申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：動(dòng)物學(xué)指導(dǎo)教師：賽道建宋茂勇20090608山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文孔板上。體外合成一個(gè)全長80bp，中間包含40個(gè)任意堿基的ssDNA文庫，以結(jié)合固定于板空上的靶蛋白，運(yùn)用RTPCR技術(shù)檢測(cè)每輪ssDNA文庫與靶蛋白的親和力。本試驗(yàn)以ELISA技術(shù)進(jìn)行適配體篩選技術(shù)方法平臺(tái)搭建，為建立適配體篩選實(shí)驗(yàn)室方法奠定基礎(chǔ)。在適配體應(yīng)用研究中，我們以

2、一種高親和力適配體作為親和熒光探針，采用自建的毛細(xì)管電泳激光誘導(dǎo)熒光(CELIF)檢測(cè)裝置，建立了一種高靈敏、快速測(cè)定人凝血酶的方法。熒光標(biāo)記的凝血酶適配體特異性地與凝血酶結(jié)合并形成穩(wěn)定的凝血酶適配體復(fù)合物，采用CELIF對(duì)復(fù)合物進(jìn)行分離檢測(cè)從而測(cè)定凝血酶濃度。本工作探討了鹽離子種類及濃度對(duì)適配體與凝血酶結(jié)合的影響，并在選定的電泳條件下對(duì)凝血酶檢測(cè)的線性范圍、檢出限和重現(xiàn)性進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果表明，鹽離子存在的條件下適配體與凝血酶的親和力降