表達(dá)新城疫病毒F、HN基因重組雞痘病毒疫苗的遺傳穩(wěn)定性和免疫效力試驗(yàn).pdf

1、新城疫(ND)是對(duì)養(yǎng)禽業(yè)危害最大的病毒性傳染病之一,其病原為新城疫病毒,是副粘病毒科腮腺炎病毒屬的代表種,為一種單股負(fù)鏈RNA病毒,融合蛋白(F)和血凝素-神經(jīng)氨酸酶(HN)是構(gòu)成病毒囊膜表面突起的兩種結(jié)構(gòu)糖蛋白,在ND的感染過(guò)程中起著重要的作用.F蛋白參與病毒的穿透、融合和溶血等作用,HN糖蛋白具有血凝素和神經(jīng)氨酸酶兩種活性,在NDV侵染過(guò)程中起著識(shí)別細(xì)胞受體的作用.兩者均是NDV的保護(hù)性抗原,具有良好的免疫原性.在雞ND的防制中,中

2、國(guó)目前仍采用疫苗接種為主的綜合防制措施.但由于ND強(qiáng)毒污染嚴(yán)重等原因常引起免疫失敗,使ND仍時(shí)有發(fā)生.該室利用基因工程方法構(gòu)建的表達(dá)NDV F<,48>E<,8>株F、HN基因的重組雞痘病毒疫苗,是構(gòu)建新型疫苗來(lái)防制ND的一種新的嘗試.該文對(duì)這兩種疫苗的穩(wěn)定性、免疫保護(hù)效力進(jìn)行了系統(tǒng)的研究,為這兩種疫苗的生產(chǎn)應(yīng)用作了進(jìn)一步的探索.在遺傳穩(wěn)定性試驗(yàn)中主要進(jìn)行了連續(xù)傳代的細(xì)胞病變產(chǎn)生速度,細(xì)胞病變的形態(tài)變化、基因表達(dá)的穩(wěn)定性試驗(yàn)、外源病毒的

3、檢測(cè)、凍干苗的保存試驗(yàn)等.為了評(píng)價(jià)這兩種疫苗的免疫保護(hù)效力,我們?cè)赟PF雞、普通肉雞和蛋雞上進(jìn)行了免疫效力試驗(yàn).應(yīng)用這兩種疫苗分別以10<'3>、10<'4>、10<'5>、10<'6>PFU/羽頸部皮下接種1日齡SPF雞群,于7、10、14、21日齡采血分離血清,測(cè)HI價(jià).表達(dá)HN的重組雞痘病毒免疫的雞于10日齡時(shí)可以測(cè)出HI價(jià),至21日齡時(shí)可達(dá)5.7log2,略低于常規(guī)疫苗.對(duì)于表達(dá)F的重組雞痘病毒用間接ELISA和競(jìng)爭(zhēng)ELISA方