白介素-3在家蠶細(xì)胞和家蠶幼蟲(chóng)中的表達(dá).pdf

1、長(zhǎng)臂猿白介素-3(GIL-3)是與人白介素-3(hIL-3)無(wú)論從基因水平還是蛋白質(zhì)水平都極 其相似的一種IL-3.GIL-3與hIL-3分子量都約為15kD,都有兩個(gè)糖基化位點(diǎn).桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)是80年代發(fā)展起來(lái)的超高效真核表達(dá)系統(tǒng),家蠶桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)比普通桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)又具有多種特有的優(yōu)勢(shì).該論文從質(zhì)粒pET3a-GIL3分離出GIL-3基因,經(jīng)鑒定后插入轉(zhuǎn) 移載體pBacPAK8,構(gòu)建了重組轉(zhuǎn)移載體pBac-CIL3,并進(jìn)行了

2、單酶切、雙酶切、PCR鑒定,證明GIL-3基因已經(jīng)正確插入轉(zhuǎn)移載體多克隆位點(diǎn).該論文采用人紅白血病TF-1細(xì)胞株進(jìn)行GIL-3活性測(cè)定,采用hIL-3抗體進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn),同時(shí)通過(guò)對(duì)GIL-3與hIL-3比較,進(jìn)行了該實(shí)驗(yàn)方案的可行性論證.該論文研究了5MOI感染BmN單層培養(yǎng)細(xì)胞的表達(dá)活性曲線.該論文還采 用TF-1細(xì)胞株體外測(cè)活性和ELISA法初步研究了不同MOI對(duì)表達(dá)量和表達(dá)活性的影響.將BmBac-GIL3針刺接種五齡家蠶幼蟲(chóng)